Annexin VkFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)

Annexin VkFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)

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品牌:莼试

货号:CSX9690

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产品详情

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库存 :36

英文名 :Annexin VkeyFlour594 Apoptosis Detection Kit

CAS号 :说见说明书

保质期 :有效期一年

供应商 :上海莼试

保存条件 :-20℃避光保存

规格 :详见说明书

操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) Annexin VkFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。


参数规格:
产品名称 Annexin VkFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)
英文名称 Annexin VkeyFlour594 Apoptosis Detection Kit
货号 CSX9690
中文名称:Annexin VkFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)
英文名称:Annexin VkeyFlour594 Apoptosis Detection Kit

产品规格:10T|20T|50T|100T
发货周期:1~3天
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素kFluor594 标记,以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
本试剂盒可用于悬浮细胞以及贴壁培养的细胞,不适用于组织。
产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液,不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方,将溶胶和结合两种功能统一,因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况,节省了需购买多种试剂盒的费用,
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
AKT1FastDigest® NdeI300 react小鼠维生素D3(VD3)免疫试剂盒

AKT1FastDigest® NdeI1000 react小鼠维生素D2(VD2)免疫试剂盒
ANGL2FastDigest® NotI20 react小鼠维生素D(VD)免疫试剂盒
Angiopoietin 4FastDigest® NotI50 react小鼠维生素C(VC)免疫试剂盒
Annexin IFastDigest® NotI150 react小鼠维生素B6(VB6)免疫试剂盒
Annexin A2FastDigest® NotI250 react小鼠维生素B12(VB12)免疫试剂盒
ATF1FastDigest® SphI (PaeI)20 react小鼠维生素A(VA)免疫试剂盒
Aquaporin 4 FastDigest® PstI800 react小鼠微管相关蛋白1A/1B轻链3B(MAP1LC3B)免疫试剂盒
Annexin VkFluor594细胞凋亡检测试剂盒(荧光显微镜专用)欧前胡素;欧芹属素;前胡内酯,白芷素Imperatorin48244020mgHPLC≥98%

蟛蜞菊内酯Wedelolactone52412920mgHPLC≥98%
七叶胆苷XVII;七叶胆皂苷XVIIGypenoside XVII8032169320mgHPLC≥98%
七叶皂苷钠Escin monosodium salt2097705320mgHPLC≥98%
桤木酮;桤木酮Alnustone3345762420mgHPLC≥98%
漆黄素;非瑟酮;紫铆素;非瑟素;3,3',4',7四羟基黄酮Fisetin52848320mgHPLC≥98%
齐墩果;土当归Oleanolic acid50802120mgHPLC≥98%
奇任醇;奇壬醇Kirenol5265956020mgHPLC≥98%
千层纸素A;木蝴蝶素Oroxylin A48011520mgHPLC≥98%
千层纸素A70βD葡萄糖醛苷;木蝴蝶素A70βD葡萄糖醛苷Oroxylin A 7Oglucuronide20mgHPLC≥98%
注意事项:
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。

 

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