β-Defensin2 mRNA原位杂交试剂盒

库存 ：45

英文名 ：详见说明书

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：一年

供应商 ：上海一研

保存条件 ：4°C保存

规格 ：100T/盒

参数规格：
产品名称  β-Defensin2 mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性: 猪
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.β-Defensin2寡核苷酸探针杂交液    2ml；
2.预杂交液                     2ml；
3.胃蛋白酶（×10;Pepsin）       2ml；
4.封闭液                       5ml；
5.生物素化鼠抗           5ml；
6.SABC-POD                     5ml；
7.生物素化过氧化物酶           5ml。

试剂盒组份：
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
产品具有以下优点：
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
3、先进的优化方案----重复性高，可靠性强
4、购买本公司的β-Defensin2 mRNA原位杂交试剂盒免费代测
5、技术服务要求：专业，规范，高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8、可检测指标齐全：炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9、经济、实惠、可靠，完善、稳定的实验体系，优秀的科研队伍，先进的实验设备、准确可靠的实验结果，是您可靠的合作伙伴。
下列产品是公司正在热销的产品：
黑芝  种属：Ganoderma sp.  描述 在木屑培养基上，不转色，72天出原基；菇中型，菌盖圆形，纵剖面近平形，菌盖黄褐色，质地中等硬度
皱盖假芝（血芝）  种属：Amauroderma rudis  描述 实体木栓化，菌盖近圆形，菌柄中生，菌 孔污白色至暗褐色，. 受伤时产生出血红色，最后变黑色。菌体表面灰褐色至黑色，无假漆狀. 光泽，有显著的纵纹和同心环带，具微绒毛或无绒毛。边缘钝或呈截形，有时薄，波浪状，稍内卷。近圆形或肾形或不规则形
血红栓菌  种属：Trametes sanguinea  描述 子实体覆瓦状叠生。革质，无柄平伏而反卷，半圆形至贝壳状，往往相互连接，1－6cm×10cm，厚0.1－0.3（0.45）cm，有细长毛和绒毛，灰褐色、灰黑色、黑色等多种颜色，有光滑、狭窄多彩的同心环带，边缘薄、完整或波浪状。菌肉白色，厚0.5－1（1－1.5）mm。菌管长0.5－2（3）mm；管口白色、浅黄色或灰色，每毫米3－5个，孢子无色，光滑，长椭圆形，4.5－7.2μm×1.8－2.7μm
黄绿蜜环菌  种属：Armillaria luteo-virens  提供形式 斜面培养物
香栓菌  种属：Trametes suaveolens  描述 子实体覆瓦状叠生。革质，无柄平伏而反卷，半圆形至贝壳状，往往相互连接，1－6cm×10cm，厚0.1－0.3（0.45）cm，有细长毛和绒毛，灰褐色、灰黑色、黑色等多种颜色，有光滑、狭窄多彩的同心环带，边缘薄、完整或波浪状。菌肉白色，厚0.5－1（1－1.5）mm。菌管长0.5－2（3）mm；管口白色、浅黄色或灰色，每毫米3－5个，孢子无色，光滑，长椭圆形，4.5－7.2μm×1.8－2.7μm
榆生离褶伞  种属：Lyophyllum ulmarium  描述 菌盖直径7~15cm，扁半球形，中部浅赭石色，边缘浅黄色，逐渐平展，光滑，有时龟裂。菌肉白色，厚。菌褶白色或近白色，弯生，宽，稍密。菌柄长4~9cm，粗1~2cm，偏生，往往弯曲，白色，内实。孢子无色，球形至近球形，5~6μm。
花脸香蘑  种属：Lepista sordida  描述 菌盖直径3~7.5cm，半球形至平展，有时中部中凹，薄，湿润时半透明状或水浸状，紫色。边缘内卷，具不明显的条纹。菌肉带淡紫色，薄； 菌褶淡蓝紫色，直生到弯生，有时稍延生，稍稀，不等长； 菌柄长3~6.5cm，粗0.2~1cm，同菌盖色，靠近基部常弯曲，内实； 无菌环及菌托； 孢子印带粉红色，孢子无色，具麻点至粗糙，椭圆形至近卵圆形，(6.2~9.8)μm×(3.2~5)μm。
大球盖菌  种属：Stropharia rugoso-annulata  描述 子实体单生、丛生或群生。菌盖直径7－45cm，初近半球形，后平展，红褐色或暗褐色，老后褐色至灰褐色，表面平滑，有纤维状或细纤维状鳞片，湿时稍有粘性，菌肉肥厚，白色。菌褶（与菌柄）直生，初近白色，后成暗紫灰色，稍宽，褶缘有不规则的缺刻。菌柄粗壮，9－15×1－4cm，向基部渐粗，中实或空，表面平滑，有丝状光泽，初白色，后灰褐黄色，菌环厚，膜质，环上有深沟纹，深裂成星形，裂片先端向上卷，菌环易脱落，在老熟的子实体上常消失，孢子印紫褐色，孢子12－15×6.5－9μm，椭圆形，顶端有明显的芽孔，厚壁，褐缘囊状体棍棒状，顶端有小突起，3.5－5.0×8.5－14.5μm
牛肝菌  种属：Boletus edulis  提供形式 斜面培养物
大孔菌  种属：Polyporus alveolaris  提供形式 斜面培养物
松木层孔菌  种属：Phellinus pini  描述 子实体多年生，无柄，木质，通常单生，有时复瓦状叠生，新鲜时硬木栓质，干燥后变为木质，且质量明显变轻。单个子实体大小为4－9 cm × 3－8 cm × 2－3 cm。菌盖半圆形或近圆形，上表面生长初期有微细绒毛，后期变为粗糙并有不规则龟裂，黑褐色或灰褐色，有同心环沟，边缘钝，黄褐色；或暗褐色。管口面黄褐色至锈褐色，有折光效应，不育的边缘明显，达5mm 宽，黄褐色；管口近圆形，每毫米8－10，管口边薄且全缘，菌肉黄褐色，木栓质，遇KOH变黑，达1cm厚。菌盖上表面后期形成一薄壳。菌管多层，分层明显，当年生菌管金黄褐色，老菌管浅褐色，木栓质，达2 cm 长。 菌肉：生殖菌丝占多数，无色至浅黄色和金黄色，薄壁至厚壁，通常简单分隔，直径为3.5－4.5μm；骨架菌丝占少数，金黄色，厚壁且有1 空腔，不分隔且不分枝，规则排列，直径为4－5μm。菌管：生殖菌丝占少数，一般存在于亚子实层，无色，薄壁，通常简单分隔，偶尔分枝，直径为1.8－2.8μm；骨架菌丝占多数，金黄色，厚壁且有1中等程度空腔，偶尔分隔，不分枝，大致平行于菌管排列，直径为2.1－3.2μm。 担子窄圆桶形，着生4 个担孢子梗，基部有一简单分隔，担子大小为7.5－10.0μm × 4.2－5.8μm；类担子占多数，圆桶形或近球形，比担子稍小。担孢子椭圆形，厚壁，褐色，光滑，
锐鳞环柄菇  种属：Lepiota acutesquamosa  描述 在木屑培养基上，不转色，80天出原基；菇中型，菌盖圆形，纵剖面近平形，菌盖黄褐色，质地中等硬度
桦剥管菌(桦滴孔菌)  种属：Piptoporus betulinus  描述 菌盖近肉质至木栓质，扁半球形、扁平，靠基部着生部分常凸起，4-24×5-35cm,，厚2-10cm，表面光滑，初期污白褐，后呈褐色，有一层薄的表皮，可剥离露出白色菌肉，边缘内卷。菌肉很厚，近肉质而柔韧，干后比较轻，呈木质。 无柄或几无柄。 孢子无色，光滑，弯曲，圆筒形或腊肠形，(4~7)μm×(1.5~2)μm。
假蜜环菌  种属：Armillariella tabescens  描述 在木屑培养基上，不转色，80天出原基；菇中型，菌盖圆形，纵剖面近平形，菌盖黄褐色，质地中等硬度
β-Defensin2 mRNA原位杂交试剂盒英文名称:Acetobacter oeni
中文名称奥氏醋杆菌
存储人:Silva et al. 2006
来源历史:
其他保藏中心编号:CIP 109171; LMG 21952; CECT 5830
分离来源:变质红酒
菌种特性
备注：
培养条件：28°C
生物安全等级:1
氧气需求:需氧
培养基:TSB培养基：1
MANNITOL AGAR
Yeast extract 5.0g
Agar 15.0g
Distilled water 1.0L
Peptone 3.0g
Mannitol 25.0g
模式菌株:是
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。