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文献和实验
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库存 :20
英文名 :详见说明书
CAS号 :详见说明书
保质期 :一年
供应商 :上海一研
保存条件 :4°C保存
规格 :100T/盒
参数规格:产品名称 Telomerase/TP-1 mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒
特异性: 人、大鼠、小鼠
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.Telomerase/TP-1寡核苷酸探针杂交液 2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.胃蛋白酶(×10;Pepsin) 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
试剂盒组份:
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
产品具有以下优点:
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、先进的优化方案----重复性高,可靠性强
4、购买本公司的Telomerase/TP-1 mRNA原位杂交试剂盒免费代测
5、技术服务要求:专业,规范,高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7、可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8、可检测指标齐全:炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
9、经济、实惠、可靠,完善、稳定的实验体系,优秀的科研队伍,先进的实验设备、准确可靠的实验结果,是您可靠的合作伙伴。
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N-Benzoyl-N-phenylhydroxylamine 304-88-1 质量规格:AR
Levosimendan 141505-33-1 质量规格:>99%,BR
Zincon 62625-22-3 质量规格:AR
Dithizone 22195 质量规格:AR
MagnesonI 74-39-5 质量规格:AR
MagnesonII 5290-62-0 质量规格:AR
Ferron 547-91-1 质量规格:AR,98.5%
3-Methyl-2-benzothialinone 38894-11-0 质量规格:AR,>98%
Miglitol 72432-03-2 质量规格:>98%,BR
Miglitol 72432-03-2 质量规格:GC>98%,标准品
1-Naphtholphthalein 596-01-0 质量规格:进口原装,>98%
Dapoxetine hydrochloride 119356-77-3 质量规格:>99%,混旋
Dapoxetine hydrochloride 129938-20-1 质量规格:>99%,右旋
Fast Black K Salt 27766-47-8 质量规格:>80%,BR
Amido black 10B 1064-48-8 质量规格:AR
Telomerase/TP-1 mRNA原位杂交试剂盒英文名称:Streptomyces cangkringensis
菌种又名:
中文名称:苍蝇链霉菌
菌种代号:DSM41769 ;NCIMB 13684
分离:恶性疟原虫根际土壤
来源历史:<< DSM << M. Goodfellow
培养基:
46
YEAST EXTRACT-MALT EXTRACT AGAR (ISP MEDIUM 2)
Yeast extract 4.0 g
Agar 20.0 g
Distilled water 1.0 L
Malt extract 10.0 g
Dextrose 4.0 g
Adjust pH to 7.3.
培养条件:28°,需氧
菌种说明:
生物安全等级:1
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。
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