Synaptophysin/SY mRNA原位杂交试剂盒

Synaptophysin/SY mRNA原位杂交试剂盒

价格: 询价

品牌:一研

货号:EY-F1381

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库存 :45

英文名 :详见说明书

CAS号 :详见说明书

保质期 :一年

供应商 :上海一研

保存条件 :4°C保存

规格 :100T/盒

参数规格:
产品名称  Synaptophysin/SY mRNA原位杂交试剂盒
规格:100T/盒

特异性: 大鼠、小鼠
标记方式: 3’—尾段标记
保存条件: 4°C保存一年
试剂盒内容:
1.Synaptophysin/SY寡核苷酸探针杂交液    2ml;
2.预杂交液                     2ml;
3.胃蛋白酶(×10;Pepsin)       2ml;
4.封闭液                       5ml;
5.生物素化鼠抗           5ml;
6.SABC-POD                     5ml;
7.生物素化过氧化物酶           5ml。

试剂盒组份:
5×Equilibration Buffer————750μl
FITC-12-dUTP Labeling Mix———100 μl
Recombinant TdT Enzyme—————20 μl
Proteinase K (2 mg/ml)————40 μl
DNase I (1 U/μl)———————5μl
10×DNase I Buffer——————100 μl
产品具有以下优点:
1、原装进口抗体----高效、灵敏、特异
2、规范包被操作----吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、先进的优化方案----重复性高,可靠性强
4、购买本公司的Synaptophysin/SY mRNA原位杂交试剂盒免费代测
5、技术服务要求:专业,规范,高效
6、适用于体液、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
7、可检测动物类型丰富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、斑马鱼等
8、可检测指标齐全:炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等
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下列产品是公司正在热销的产品:
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 N-Acetyl-DL-methionine  1115-47-5  质量规格:0.99
 DL-Homocysteine   454-29-5  质量规格:0.95
 m-Fluoro-DL-tyrosine   403-90-7  质量规格:0.99
 Calpain Inhibitor I(ALLN)   110044-82-1  质量规格:≥95%,美国进口
 DL-Ala-DL-Ala  2867-20-1  质量规格:0.97
 DL-Alanyl-DL-norvaline  2325-18-0  质量规格:0.99
 3-(1-Naphthyl)-L-alanine  55516-54-6  质量规格:>98%,BR
 Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanine  138774-94-4  质量规格:0.98
 L-Citrulline   372-75-8  质量规格:>99%,BR
 Fmoc-L-Citrulline  133174-15-9  质量规格:>98%,BR
 Boc-L-β-homoalanine  158851-30-0  质量规格:>98%,BR
 Boc-L-ß-homoaspartic acid 5-benzyl ester  254101-10-5  质量规格:0.98
 Fmoc-β-homoaspartic acid  209252-17-5  质量规格:>98%,BR
 Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester  203854-49-3  质量规格:0.98
 H-HomoArg-OH  156-86-5  质量规格:98%,BR,L型
Synaptophysin/SY mRNA原位杂交试剂盒英文名称:Rhodopseudomonas pseudopalustris,假性沼泽红假单胞菌

菌种又名:Rhodopseudomonas rutila
中文名称:假性沼泽红假单胞菌
菌种代号:NBRC 100419; DSM 123; NCIMB 8252
分离:地表水或泥浆
来源历史:<< NBRC << NCIMB << S.R. Elsden << C.B. van Niel, ATH 2.1.6
培养基:
584
PYM Medium
Polypepton* 10 g
Distilled water 1 L
Agar (if needed) 15 g
Yeast extract 2 g
MgSO4·7H2O 1 g
pH 7.0 (*Prepared medium is available from Wako Pure Chemical Ind., Ltd., Osaka, Japan.)
903
RHODOSPIRILLACEAE MEDIUM (modified)
Na2-succinate 1.00 g
(NH4)-acetate 0.50 g
Fe(III) citrate solution (0.1% in H2O) 5.00 mL
KH2PO4 0.50 g
MgSO4 · 7 H2O 0.40 g
NaCl 0.40 g
NH4Cl 0.40 g
CaCl2 · 2 H2O 0.05 g
Vitamin B12 solution (10 mg in 100 mL H2O) 0.40 mL
Trace element solution SL-6 (see below) 1.00 mL
Resazurin (0.1%) 0.50 mL
Distilled water 1000 mL
Yeast extract 0.30 g
L-Cysteiniumchloride 0.30 g
Adjust pH to 6.8. Boil the medium for a few minute. Bubble the medium with nitrogen gas and fill 10 ml in 15 ml tubes with a rubber septum under a stream of nitrogen gas. Autoclave at 121°C for 15 min. Sterile syringes are used to inoculate and remove samples. Incubate in the light using a tungsten lamp.
Trace element solution SL-6
ZnSO4·7 H2O 0.10 g
MnCl2·4 H2O 0.03 g
H3BO3 0.30 g
CoCl2· 6 H2O 0.20 g
CuCl2 ·2 H2O 0.01 g
NiCl2· 6 H2O 0.02 g
Na2MoO4·2 H2O 0.03 g
Distilled water 1000 mL
培养条件:30°C 7天
菌种说明:1.菌株復活:冷凍管立即置於37℃恆溫水槽回溶,回溶菌液必須全部吸取至 10 mL 的新鮮培養基中進行活化培養。冷凍管菌液不要重複冷凍解凍。
2.特殊培養條件:厭氧和光照。
3.增殖培養的接種量需求:接種菌液的體積必須佔新鮮培養基的 20% 至 50%。
生物安全等级:1
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲苯透明,封片。


 

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