羊抗兔IgG-HRP

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英文名 ：Goat Anti-rabbit IgG/HRP antibody

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

保存条件 ：-20℃

规格 ：瓶

羊抗兔IgG-HRPP3HR1细胞，人EBV阳性B瘤细胞 大鼠胰腺癌细胞株,DSL-6A/C1细胞 人小脑星形胶质细胞cDNAHA-c cDNA阿立哌唑-d8质量规格：美国进口Aripiprazole-d8
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产品名称：羊抗兔IgG-HRP
英文名称: Goat Anti-rabbit IgG/HRP antibody
中文名称: 辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG
应用: WB=1:200-5000 ELISA=1:500-5000 IHC-P=1:20-500
保存: -20℃
纯化方法: affinity purified by Protein A
亚型: IgG
克隆类型:polyclonal
过氧化物酶（HRP）标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。本公司制备的各种HRP标记抗体，均根据改良的过钠氧化法标记而成。本产品每0.1ml液体含有HRP约200ug/支，IgG约含400ug/支。
工作效价：ELISA法：1：500～5000，用TMB作底物（OD450nm）P/N＝2.5～3.0为阳性。免疫印迹：1：200～5000。免疫组化：1：20～500。
酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。目前较为常用的是将辣根过氧化物酶(HRP)，经过钠氧化而标记在抗体IgG分子上，而制成HRP—抗体结合物。公司向用户提供的各类酶标物，均根据本公司建立的改良过钠氧化法标记而成。每种成品已加入一定浓度的BSA作为稳定剂。产品的工作浓度根据方法不同而别，用前最好-20℃冻存，避免反复化冻。
应用范围：
抗原决定族的抗原性分析鉴定，各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。
工作中易产生的问题：
1.包被抗体或抗原不适，易产生阳性值较小，或产生变异，即跳管现象。
2.用抗血清不纯化，或纯化程度太低的抗体包被，则阳性值较小，或没有阳性梯度。
3.封闭不好或标记物过浓可产生对照较高。
储存条件
Storeat–20oCforoneyear.Avoidrepeatedfreeze/thawcycles.Thelyophilizedantibodyisstableatroomtemperatureforatleastonemonthandforgreaterthanayearwhenkeptat-20oC.Whenreconstitutedinsteriledistilledwaterordiluentsupplied,theantibodyisstableforatleasttwoweeksat2-4°C.
备注：产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。

产品名称	羊抗兔IgG-HRP
英文名称	Goat Anti-rabbit IgG/HRP antibody
货号	BH-DB1199

操作步骤：
Ⅰ 实体组织蛋白的提取
 1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制剂， 1 μL蛋白酶抑制剂和 5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
2．  每100mg固体组织置于培养皿中，手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃匀浆器上下手动匀浆15次，注意低温操作；
3． 取组织匀浆液转移到1.5mL预冷的离心管，离心10000转/分，4℃离心5 min；
4． 取上清转移至新的预冷的离心管中，即为全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
Ⅱ 培养细胞蛋白提取
1． 贴壁培养的细胞，吸去培养基后，加入10mL/150mm培养板的冷PBS洗两次，每次振摇数次以尽量去除培养液；
2． 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞，将细胞及培养液移至离心管中， 1000转/分离心10 min，再用10mL/150mm培养板的冷PBS，1000转/分离心5 min洗两次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制剂， 1μL蛋白酶抑制剂和5μL 100mM PMSF，混匀。冰上保存数分钟待用。
4． 细胞洗涤后，转至新的预冷的离心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

细胞数量	Lysis Buffer加入量
107个	0.5 mL～1 mL
5×106个	0.2 mL～0.5 mL

5．置于4℃摇床平台上，温和振荡15 min；
6． 14,000rpm，4℃离心15min，取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
固定液的应用：
1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以pH7 2～7 4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封…
1．单纯固定液
(1)4％中性甲醛固定液：zui常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。一般无特殊要求的病理标本均适用。尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不 超过一个月。
(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液
(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。需现配现用。
(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效
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