MTT检测试剂盒

库存 ：21

英文名 ：MTT Assay Kit

CAS号 ：说见说明书

保质期 ：有效期一年

供应商 ：上海莼试

保存条件 ：-20℃保存

规格 ：500次

参数规格:

产品名称	MTT检测试剂盒
英文名称	MTT Assay Kit
货号	CS-X9631

中文名称：MTT检测试剂盒
英文名称：MTT Assay Kit
产品规格：500次
发货周期：1～3天
TT广泛用于检测细胞生长，其原理是MTT可以被活细胞线粒体内的脱氢酶还原生成深紫色的formazan结晶，而死细胞则无此活性。深紫色的formazan结晶被溶解后可以通过测定490nm波长的光吸收而测定出其浓度，并由此推测出细胞的活力，细胞增殖越旺盛，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。其原理如下：

产品特点：
1．采用独特的Formazan溶解液，可以充分溶解formazan，减少误差。
2．背景低，灵敏度高，线性范围宽，重复性好。
3．本产品为足够500次(5个96孔细胞培养板)微孔板检测。
4．可用于生物活性因子活性检测、抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性测定等。
储存条件：低温运输、-20℃保存(但溶液B也可以常温运输和保存)，有效期一年。
使用方法：
下面操作是检测细胞毒性的试验，其他应用跟此类似或更简单(如生长曲线试验)，操作步骤可以以此为基础稍作修改即可，故不再赘述。
注意事项：
1. MTT检测试剂盒微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。
产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化钠和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的溶胶液/结合液配方，将溶胶和结合两种功能统一，因此一个试剂盒可以运用于琼脂糖DNA回收、PCR产物清洁纯化、酶切产物纯化回收等多种情况，节省了需购买多种试剂盒的费用，
4.溶胶液/结合液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果，大大提高回收效率。
5.改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性，即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
6.快速、方便，不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。

操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
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CCL17     Protein    Human    重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白
CCL15     Protein    Human    重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 标签)
CXCL2     Protein    Mouse    重组小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 标签)
CCL17     Protein    Human    重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 标签)
CXCL1     Protein    Human    重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 标签)
CCL8     Protein    Human    重组人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 标签)
CCL7     Protein    Human    重组人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 标签)
CXCL16     Protein    Mouse    重组小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签)
CCL5     Protein    Human    重组人 CCL5 / RANTES 蛋白 (His & mucin 标签)
IL8     Protein    Human    重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)
IL8     Protein    Human    重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77, Fc 标签)
IL8     Protein    Human    重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77)
IL8     Protein    Human    重组人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 标签)
PF4     Protein    Human    重组人 CXCL4 / PF4 蛋白
CXCL12     Protein    Human    重组人 CXCL12 / SDF1b 蛋白 (Fc 标签)
CX3CL1     Protein    Human    重组人 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (His 标签)
CCL1     Protein    Human    重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 标签)
集落刺激因子            
MTT检测试剂盒CSF1     Protein    Mouse    重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白
CSF2     Protein    Rat    重组大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)
CSF2     Protein    Rat    重组大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)
CSF2     Protein    Mouse    重组小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)
CSF2     Protein    Mouse    重组小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)