纳米材料内毒素定性定量检测

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内毒素是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫做脂多糖。脂多糖对宿主是有毒性的。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来，所以叫做内毒素。

    一般细菌毒素可分为两类，一类为外毒素(Exotoxin);它是一种毒性蛋白质，是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。产生外毒素的细菌主要是革兰氏阳性菌。如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、金黄色葡萄球菌以及少数革兰氏阴性菌。另一类为内毒素(Endotoxin)。是革兰氏阴性菌的细胞壁的产物。细菌在生活状态时不释放出来，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。

外毒素与内毒素的对比

内毒素是由多糖、脂质和蛋白质组成的复合体。脂多糖是革兰氏阴性菌的主要成分之一，在传统概念中，又称为内毒素，在体内可引起发热反应 、白细胞反应 、内毒素血症与内毒性休克、弥漫性血管内凝血，甚至导致死亡。脂多糖是食品、护肤品、医疗产品等与人体密切接触的工业产品安全性是否达标的重要生物指标。

目前，内毒素检测-鲎试剂检测法，鲎试剂是由海洋生物鲎的血液变形细胞溶解物制成的无菌冷冻干燥品，含有能被微量细菌内毒素和真菌葡聚糖激活的凝固酶原，凝固蛋白原，能够准确、快速地定性或定量检测样品中是否含有细菌内毒素。在传统工业产品的安全性检测中，该方法具有简单、易操作、适合高通量检测等优点。然而，纳米材料由于其高表面活性 、类生物分子活性，鲎试剂法在检测纳米材料的内毒素含量时往往存在假阳性的数据（Li et al, NANOTOXICOLOGY，2015，462-473），影响对纳米产品安全性的准确评估。例如，氧化石墨烯纳米材料具有类内毒素的亲和性能与细胞Toll样受体结合（Qu et al, ACS Nano, 2013，5732； Chen et al, ADVANCED HEALTHCARE MATERIALS， 2014，1486）。此外，尽管市场上还有酶联免疫法，即利用试剂盒中的脂多糖抗体与脂多糖中的O-抗原反应而实现对脂多糖进行检测，但是由于脂多糖是胸腺非依赖性抗原（TI抗原），不能诱导产生高亲和力的抗体，所以该方法存在特异性差，抗干扰能力弱等缺陷，也很难应用于纳米产品的内毒素检测。

为了解决纳米材料内毒素检测结果不准确的问题，我公司技术研发团队在基于液质联用仪基础上建立了一种内毒素降解定性定量检测法