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库存 :53
英文名 :Goat anti-Bovine IgG
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海博湖
保存条件 :储存条件: -20°C
规格 :瓶
产品名称:羊抗牛IgG(纯化)英文名称: Goat anti-Bovine IgG
储存条件: -20℃
纯度: 5mg/ml
外观(性状): 各种纯化抗体均为液体提供
单位: 瓶
采用硫酸铵盐析与DEAE-离子交换纤维素层析,或批次吸附纯化,制成高纯度(﹥95%)和高活性的纯化IgG抗体。各种纯化抗体均为液体提供,可根据用户要求,配成不同浓度,用前最好-20℃存放,可根据使用方法采用不同浓度稀释。通常不同使用目的可分别用下列缓冲液稀释,注意完全化冻,充分混匀。用前最好低温高速离心去除冷聚合球蛋白及变性蛋白后,重新定量。
金标记:用pH9.0硼酸缓冲液稀释,1~2mg/ml标记。
荧光标记:用0.5mol/LpH9.5、CB(碳酸盐缓冲液)稀释,10~20mg/ml标记。
生物素记抗体:用0.1mol/LNaHCO3稀释,1~2mg/ml标记。其它方法,如免疫扩散可用0.01mol/LpH7.2PBS稀释,ELISA包被10~20μg/ml4℃过夜或37℃2h。
备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。
产品参数:
产品名称 | 羊抗牛IgG(纯化) |
英文名称 | Goat anti-Bovine IgG |
货号 | BH-DB1078 |
注意事项:
1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。
2、虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。
3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
4、本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作
操作步骤:
根据使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui终浓度为 1mM。混匀备用(PMSF 现用现加)。
1、样品前处理:
a)对于贴壁细胞:去除培养液,用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。
b)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成 50-100 万细胞/管,然后再裂解。
c)对于组织样品: 把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量)。用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
2、后处理:
将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟,取上清,即可进行后续的蛋白浓度测定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
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温馨提示:
工作液与浓缩液选择的技巧,以及各自的优势。
1,工作液的优势:工作液操作方便,降低实验操作步骤,对于要求无菌的实验,降低染菌风险。
2,浓缩液的优势:浓缩液成本相对较低,实验范围更广,对于不要求无菌的实验,可以进行多种浓度的实验分析以及比较。而且由于浓度高,保存更加稳定。
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