产品详情
文献和实验
相关推荐
库存 :50
英文名 :植物RNA提取试剂盒 Plant RNA Kit
供应商 :上海信裕生物科技有限公司
规格 :50T;100T
植物RNA提取试剂盒 Plant RNA Kit产品简介
Plant RNA Kit可以快速简便地从广泛的植物及真菌中提取到高质量的细胞总RNA。最多100mg 湿的组织可以在1小时内处理完毕。可以有效的去除组织裂解物种的多糖,酚类,以及酶抑制物。可以同时进行多个样品的处理。
试剂盒组成
产品编号 | 50T | 100T |
次数 | 50 | 100 |
纯化柱子 | 50 | 100 |
收集管 | 50 | 100 |
RNAplus | 24ml | 48ml |
Buffer PP | 10ml | 30ml |
RNA Wash Buffer I | 33ml | 55ml |
RNA Wash Buffer II | 13ml | 26ml |
DEPC-Water | 13ml | 20ml |
说明书 | 1 | 1 |
储存和稳定性
Plant RNA Kit在购买后可保存至少12个月;所有组分储于室温(22-25℃)。RNAplus加入巯基乙醇后请于4℃保存,有效期为6个月。
预防RNase 污染,应注意以下几方面:
z 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。
z 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
z RNA 在RNAplus-巯基乙醇中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含 RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在1500C烘烤4 小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
z 配制溶液应使用RNase-free ddH2O。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度 0.1%( v/v),混匀后放置过夜,高压灭菌)。
浓缩的RNA Wash Buffer需用无水乙醇按如下稀释:
z 50T加入52 ml ;100T的每瓶加入104 ml 无水乙醇。
RNAplus使用前必须加入巯基乙醇
z 50T的加入6ml;100T的加入12ml;
操作步骤
1.液氮研磨植物样本,取小于100mg样品置于RNase-free的离心管中,加入0.5ml RNAplus,振荡彻底混匀。
注意:RNAplus使用前须按要求加入巯基乙醇。
2.室温12,000×g下离心2min,转移上清至新的RNase-free的1.5ml离心管中。
3. 加入100μl Buffer PP,再加入300μl氯仿,剧烈混匀后室温下,12,000×g下离心3min。
4.小心地转移不多于80%上层水相至一新的离心管中。加入等倍体积的70%乙醇(如400μl水相,加入400μl 70%乙醇),颠倒混匀。
注意:70%乙醇,需要DEPC水配制,用户自备。
5.把吸附柱装在在2ml收集管中(已提供),将第6步得到的溶液全部转入柱中,10,000×g离心1min,倒弃流出液重新套上收集管。
6.加入500μl RNA Wash Buffer I至柱子中,10,000×g离心1min,倒弃流出液;
7.加入600μl RNA Wash Buffer II至柱子中,10,000×g离心1min,倒弃流出液;
注意:RNA Wash Buffer II使用前须按要求用无水乙醇稀释。如果放入冰箱中,使用前须恢复到室温。
8.再加入600μl RNA Wash Buffer II至柱子中,10,000×g离心1min,弃去流出液;
9. 将吸附柱重新套回2ml收集管中,最大转速(>13.000×g)离心空结合柱1min以干燥柱子的基质;这一步对下面的洗脱步骤至关重要。
10. 将吸附柱转入一个新的离心管中,加30-100μl DEPC-Water,室温放置1 分钟,12,000 rpm (~13,400×g)离心30秒。洗脱缓冲液体积不应少于30μl,体积过小影响回收效率。且RNA 应保存在-70℃,以防降解。
上海信裕生物科技有限公司
品牌商实名认证
钻石会员
入驻年限:12年