4×Hifair® V nCov 多重定量PCR反应RT-qPCR预混液

4×Hifair® V nCov 多重定量PCR反应RT-qPCR预混液

价格: ¥2782

品牌:翌圣生物(Yeasen) 品牌认证

货号:13112ES60

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产品详情

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库存 :大量

英文名 :4×Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix

CAS号 :点击查看

保质期 :有效期1年

供应商 :翌圣生物科技(上海)股份有限公司

保存条件 :冰袋运输。-20℃保存,推荐分装冻存,避免反复冻融。

规格 :100T

产品信息
产品名称 产品编号 规格 价格(元)
4×Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix 13112ES60 100 T 2782.00
4×Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix 13112ES80 1000 T 24062.00
4×Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix 13112ES92 10000 T 185762.00

产品描述
4×Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Mix是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的预混合溶液。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。
本品利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。除上述酶外,预混液还含有dNTPsMg2+等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够在保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。


产品组分
组分编号 组分名称 产品编号/规格
13112ES60 (100 T) 13112ES80 (1000 T) 13112ES92 (10000 T)
13112-A 4×Hifair® V MP Mixa,b 600 μL 6 mL 60 mL
【注】 a) 4×Hifair® V MP Mix主要包含的酶有Hifair® V Reverse TranscriptaseRNase inhibitorUNICON® HotStart Taq DNA Polymerase
b) 不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。

适用机型
ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;
Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.

运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存,有效期6个月。本品避免反复冻融。建议分装保存。

注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
 

反应体系(以25 μL体系为例说明)
组分 体积(μL
4×Hifair® V MP Mix 6
Primer/Probe Mix (10 μM) 5
模板RNA 1 - 14
RNase Free H2O To 25
】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物和探针浓度:Primer/Probe Mix中包含多对引物和探针,通常每条引物终浓度为0.4 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整;每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
b) 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在在20-35之间适宜。
c) 反应体系:推荐使用25 μL30 μL50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
d) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
  反应阶段 温度 时间 循环数
1 逆转录 50℃a 10 min 1
2 预变性 95℃ 5 min 1
3 扩增反应 95℃ 15 sec 45
60℃b 30 secc
【注】                                                                                            
a) 逆转录:42℃或者50℃均可,时间10-15 min
b) 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整CDC官方推荐的ORF1abN引物,退火温度建议≥60℃。
c) 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。

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