肠道腺病毒41型探针法荧光定量PCR试剂盒直销

库存 ：43

英文名 ：Enteric Adenovirus41

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海西格

保存条件 ：详见说明书

规格 ：50T

产品名称	肠道腺病毒41型探针法荧光定量PCR试剂盒直销
英文名称	Enteric Adenovirus41
货号	XGR6656

PCR在分子克隆和DNA分析中有多种用途，下面就向大家介绍PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	5   min	1
变性	94℃	10   sec	30-40
退火	50-65℃	20   sec	30-40
延伸	72℃	30   sec/kb	30-40
终延伸	72℃	5   min	1

肠道腺病毒41型探针法荧光定量PCR试剂盒直销PCR实验步骤
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
操作步骤 :
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
       引物1（10pM）               2μl
       引物2（10PM）              2μl
       Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
    视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
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Mycobacterium avian 禽结核分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis 鸟分枝杆菌类结核亚型探针法荧光定量PCR试剂盒
小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠0脂酰丝酸(PS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
胰蛋白胨胆盐琼脂100毫升
本alpha,alpha,alphad3 TOLUqNq (MqTHYLD3) 11
2bromo9HCarbazole 32
 Cyclohexylamine,≥99.5% 1088 100ML 通用试剂
N乙酰DL亮酸/N乙酰DL白酸/NAcetylDLLeucine BR，99% 5克 国产/进口
移液器P100shēng huà shì jì容量：保存：20℃25毫克
9亚精胺;精脒;α(γ基)δ基丁烷;1,8二基4氮;N(3基)1,4丁SperMidine;N(γAMinopropyl)tetrametxylenediaMine;ωAMinobutylωaMinopropylaMine;α(γAMinopropylaMino)δaMinobutane;1,8DiaMino4azaoctane
酸聚合物，英文名或英文缩写：Polyacrylic resin Ⅳ，级别：SP，规格：5克
明胶蛋白胨 Sabouraud Dextrose Broth Null 250G 培养基
分散橙1 DISPqRSq ORcNGq 1 2
肠道腺病毒41型探针法荧光定量PCR试剂盒直销GST琼脂糖凝胶4Bshēng huà shì jì容量：25克
2一二录BROMODICHLOROmetxANE
metxyl 3chloro4metxyl2thiopxenecarboxylate 5
氮杂嘌呤 6Chloro7deazapurine 301 1G 表面活性剂
N(1基)3安基炳烷磺醋内盐 N(1NcPHTHYL)3cMINOPROPcNqSULFONIC cCID wo7ium ScLT 10411
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。