聚蔗糖Ficoll400说明书

聚蔗糖Ficoll400说明书

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品牌:抚生 品牌认证

货号:FS-79110

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库存 :47

英文名 :FicollTMPM400

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海抚生

保存条件 :低温冷藏

规格 :10g


1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称  聚蔗糖Ficoll400说明书
规格: 10g
有效期4年
溶解性60mg/mLinwater
别名 聚蔗糖400
英文名称 FicollTMPM400
储存条件   RT
纯度99%
外观(性状)白色粉末
单位瓶
产品说明:平均分子量400000


1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。

      聚蔗糖Ficoll400说明书尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
100mg DNase I干粉 DNase I Powder 4℃-20℃保存
2 ug pCaspase3-sensor pCaspase3-sensor 低温运输,-20℃保存
100mL AMPD Buffer0.2MpH7.5  AMPD Buffer0.2MpH7.5  常温保存
月桂基硫酸盐蛋白胨肉汤-MUG 英文名称:LST-MUG 产品规格:1000ml 
10g Nα- 甲酰精氨酸乙酯 BAEE(Nα-Benzoyl-L-Arginine Ethyl Ester Hydrochloride) 4℃保存
225ml碱性蛋白胨水均质袋 Alkaline peptone water 10/
霍乱弧菌成套生化鉴定管  21*1/*10
煌绿琼脂 英文名称:Brilliant Green Agar 产品规格:250g 
1瓶 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]细胞株 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 低温运输和保存
2 ug pUG6.0 pUG6.0 低温运输,-20℃保存
改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素,(mLST-Vm)颗粒 英文名称:Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- Vancomycin 产品规格:300ml/*10 
500U 限制性内切酶MboI Restriction Endonuclease -20℃保存
2 ug pcDNA3.1 tdTomato pcDNA3.1 tdTomato 低温运输,-20℃保存
解磷细菌培养基 Norganic Phosphorus Bacteria 250g
平板计数肉汤(PCB) 英文名称: 产品规格:250g 
1瓶 HEC-1-A细胞株 HEC-1-A 低温运输和保存
2 ug pRLuc-N2 pRLuc-N2 低温运输,-20℃保存
聚蔗糖Ficoll400说明书L-鼠李糖;鼠李糖一水 L(+)-Rhamnose monohydrate 130-85-0 质量规格:≥98%BR
头孢氨苄 Cephalexin 23325-78-2 质量规格:>98%,BR,一水合物
1--4-壬基(>95.0%(GC)) 1-Bromo-4-nonylbenzene 51554-94-0 质量规格:>95.0%(GC)
环嗪酮(标准品) Hexazinone 51235-04-2 质量规格:分析标准品,98%
1 bp plus DNA Ladder 50T  
茚地那韦 Indinavir sulfate 157810-81-6 质量规格:>97%
阿达唑(标准品) Albendazole 54965--8 质量规格:>98%,标准品
Levamisole hydrochloride 咪唑 5g  
乙基纤维素 Ethyl cellulose 94-57-3 质量规格:CP
骆驼蓬碱;骆驼蓬灵;哈梅灵(标准品) Harmaline;Dihydroharmine 304--2 质量规格:HPLC≥98%,标准品
曙红Y(水溶) Eosin Y water solution 17372-87-1 质量规格:BS
多沙普仑 Doxapram hydrochloride 113-07-5 质量规格:美国进口
鸟苷酰(2' 5')腺苷铵盐 Guanylyl(2' 5')adenosine ammonium salt  103192-47-8 质量规格:美国进口
罗哌卡因(标准品) Ropivacaine base 84057-95-4 质量规格:HPLC≥98%,标准品
头孢克洛 Cefaclor 70356-03-5 质量规格:>98%,一水合,BR
依诺肝素钠 Enoxaparin sodium 679809--6 质量规格:BR,细胞培养级;Anti-factor Xa activity(dried substance)90.0~125.0IU/mgAnti-factor Ⅱa activity(dried substance) 20.0~35.0IU/mg。符合USP35标准

 

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