RPMI1640Medium,PowderGibco哪里有买

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品牌:抚生 品牌认证

货号:FS-79004

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库存 :23

英文名 :1640Medium

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海抚生

保存条件 :低温冷藏

规格 :10×1L


1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称  RPMI1640Medium,PowderGibco哪里有买
规格: 10×1L
英文名称 1640Medium
储存条件   2-8℃
单位盒
描述
RoswellParkMemorialInstitute(RPMI)1640mediumwasoriginallydevelopedtoculturehumanleukemiccellsinsuspensionandasamonolayer.RPMI1640hassincebeenfoundsuitableforavarietyofmammaliancellsincludingHeLa,Jurkat,MCF-7,PC


1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。

     RPMI1640Medium,PowderGibco哪里有买尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
乙基紫叠肉汤(litsky肉汤)  250g
大肠菌群大肠杆菌显色培养基(ECC) 用于大肠菌群和大肠杆菌的快速检测和计数 1000ml
D-环丝氨酸溶液 英文名称: 产品规格:5ml*10 
125mL RNase-Free TE Buffer(无RNaseTE缓冲液),pH8.0    RNase-Free TE BufferpH8.0    常温保存
赖氨酸培养基(LYS)  250g
20次 天净沙通用型MLPA试剂盒 Single Cell RNA Amplification Kit -20℃保存
50mg 刀豆球蛋白 A Ⅲ Con A Ⅲ 4℃保存
2 ug pET-GST pET-GST 低温运输,-20℃保存
3%NaCl乳糖生化鉴定管 用于弧菌的耐盐试验。 20/
T1N0肉汤 英文名称:TIN0 Broth 产品规格:250g 
500mL MES Buffered Saline,5X,pH7.0  MES Buffered Saline,5X,pH7.0  常温保存
萘啶酸2.25mg  2.25mg/*5
胆盐乳糖培养基(BL) 用于药品中大肠杆菌和绿脓杆菌的增菌培养。 250g
100µg 人玻连蛋白 Vitronectin -20℃保存
2 ug pCI pCI 低温运输,-20℃保存
肝浸粉 Liver Infusion 100g
去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂 英文名称:DCLS Agar 产品规格:250g 
RPMI1640Medium,PowderGibco哪里有买利福喷丁 Rifapentine 61379-65-5 质量规格:>97%
Valepotriate 缬草三酯 18296-44-1  20mg
9-(2-羟丙基-d6)腺嘌呤 9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine 1020719-54-3 质量规格:美国进口
4-去乙酰基长春新碱代盐 4-Desacetyl Vincristine Methosulfate 6904 质量规格:美国进口
4,4',4''-Methylidynetrisbenzonitrile 4,4',4''-Methylidynetrisbenzonitrile 113402-31-6 质量规格:美国进口
(+)-α-Tocopherol 维生素E (Vitamin E) 5g  
人参皂苷RH4 Ginsenoside RH4 1747-08-5 质量规格:HPLC≥98%,标准品
(+)-儿茶素(标准品) (+)-Catechin 154-23-4 质量规格:HPLC≥98%,标准品
SYBR Green II(1×) 1ul  
三胸苷;三尿苷(TFT)  Trifluridine; Trifluorothymidine 70-8 质量规格:>98%
Harpagoside 哈巴俄苷 190-12-9  20mg
尼美舒利(标准品) Nimesulide 51803-78-2 质量规格:含量测定
(S,S)-帕洛诺司琼盐-d4 (S,S)-Palonosetron Hydrochloride Labeled d4 135729-62-3 质量规格:美国进口
罗舒伐他汀酰基-β-D-葡萄糖苷酸 Rosuvastatin Acyl-β-D-glucuronide 503610-44-4 质量规格:美国进口
DL-α-羟基戊二酸二钠 DL-α-Hydroxyglutaric acid disodium salt  40951--1 质量规格:98%,GC,进分sigma 94577
灭菌封瓶膜 16cm×16cm 5张  包

 

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