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文献和实验
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提供商 :江苏集萃药康生物科技股份有限公司
服务名称 :NCG-HLA-A2.1
规格 :根据客户需求提供
NCG-HLA-A2.1
品系名称:NOD/ShiLtJGpt-Prkdcem26Cd52Il2rgem26Cd22H2-KemCin(HLA-A2.1)/Gpt
品系类型:Knock-in
品系编号:T003278
背景:NOD/ShiLtJGpt
品系描述
HLA-A编码人的I类主要组织相容性复合物(Major histocompatibility complex I, MHC I)的α链。MHC I由α链及β链(由B2M基因编码)组成,α链包含负责抗原结合的可变区α1、α2和序列恒定的α3及跨膜、胞内区。MHC I表达于所有的有核细胞表面,负责抗原提呈,参与CD8+ T细胞成熟及CTL识别过程[1]。研究证实,α3与CD8的相互作用具有种属特异性,全人源化的HLA-A2.1转基因小鼠CD8+ T细胞成熟受损[2],而将HLA-A2.1的α1、α2和鼠源的α3及后续部分拼接成为嵌合片段后制作的转基因鼠,则CD8+T细胞发育正常,且具有正确的HLA-A2.1限制性CTL识别[3-7]。
集萃药康自主研发的HLA-A2.1品系选择重度免疫品系NCG作为背景,使用在人群中出现频率较高的HLA-A*02:01[8]基因片段替换在小鼠中对T细胞成熟过程影响较大的H2-K基因的胞外部分,利用基因编辑技术制作了NCG-HLA-A2.1小鼠模型,该模型拥有人源的α1、α2、α3和鼠源的跨膜及胞内区。人源α1、α2能够以人类HLA-A2.1抗原结合区提呈抗原,鼠源胞内区则完成胞内信号传导,同时,NCG背景使其能够接受人类造血干细胞移植,人源的α3可与人源CD8相互作用,促进T细胞的成熟及CTL识别。NCG-HLA-A2.1是造血系统人源化的理想模型。
品系策略
NCG-HLA-A2.1小鼠人源化策略
特点:
1.以NCG为基础,拥有重度联合免疫缺陷特征
2.由鼠源MHC I和人源HLA(HLA-A*02:01)组成的嵌合蛋白,有人源的抗原结合区和鼠源的信号传导区
3.促进免疫系统的人源化,特别是CD8+T细胞的成熟
应用领域
1、 疫苗研究
2、 造血干细胞移植
3、 免疫系统人源化
4、 免疫学相关研究
验证数据
1. MHCI表达检测
图1 NCG-HLA-A2.1小鼠人源 HLA-A2.1表达检测。该品系小鼠细胞表面能够正确表达人源HLA-A2.1。
2.T/B/NK细胞比例检测
图2 NCG-HLA-A2.1人源化小鼠T/B/NK细胞比例检测。NCG对照鼠和NCG-HLA-A2.1人源化小鼠外周血中几乎没有CD3+T、CD19+B、NK细胞,也没有CD4+/CD8+ T细胞。NCG-HLA-A2.1人源化纯合小鼠及NCG小鼠体内的T/B/NK细胞比例类似。
3.体内药效实验
在NCG-HLA-A2.1小鼠模型皮下接种Raji-PBMC混合细胞后测试Ab-1抗体的肿瘤抑制药效
Data from WuXi Biologics
图3 基于NCG-HLA-A2.1小鼠的体内药效试验。将对数生长期的淋巴瘤细胞Raji与HLA match的PBMC细胞混合接种至6-8周龄的NCG-HLA-A2.1(HLA人源化小鼠)皮下,待肿瘤生长至平均体积约70mm3时随机分为Vehicle(NCG-WT)组(n=7),Vehicle(NCG-HLA)组(n=6),Ab-1(NCG-WT)用药组(n=7),Ab-1(NCG-HLA)用药组(n=7)并使用相应的药物进行治疗。每周给药2次,共给药6次。
结果显示NCG-HLA-A2.1小鼠与NCG-WT小鼠的肿瘤生长趋势一致,有较好的成瘤性;Ab-1对肿瘤生长有抑制作用,Ab-1(NCG-WT)用药组TGI=15.6%,Ab-1(NCG-HLA)用药组TGI=47.0%(图A)。四组小鼠体重变化趋势接近(图B)。
结果证明NCG-HLA-A2.1人源化小鼠是造血系统人源化及体内药效评价的理想模型。
参考文献
1.Hewitt, Eric W. "The MHC class I antigen presentation pathway: strategies for viral immune evasion." Immunology 110.2 (2003): 163-169.
2.Le, A. X., E. J. Bernhard, M. J. Holterman, S. Strub, P. Parham, E. Lacy and V. H. Engelhard (1989). "Cytotoxic T cell responses in HLA-A2.1 transgenic mice. Recognition of HLA alloantigens and utilization of HLA-A2.1 as a restriction element." J Immunol 142(4): 1366-1371.
3.Vitiello, A., D. Marchesini, J. Furze, L. A. Sherman and R. W. Chesnut (1991). "Analysis of the HLA-restricted influenza-specific cytotoxic T lymphocyte response in transgenic mice carrying a chimeric human-mouse class I major histocompatibility complex." J Exp Med 173(4): 1007-1015.
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