平板克隆试验价格_品牌:-丁香通官网

服务名称：平板克隆试验

提供商：MDL-北京百奥思科

规格：具体联系客服

克隆形成试验可反映细胞群体依赖性和增殖能力。一般细胞在体外增殖六代以上，其后代形成的细胞群体称为细胞集落或克隆。每个克隆由单一细胞而来，含有50个以上细胞，大小在0.3-1mm之间。通过克隆形成可检测各种理化因素对细胞克隆形成能力的影响。平板克隆形成试验可检测贴壁细胞细胞的克隆形成能力，软琼脂集落形成试验可检测非锚着依赖生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系等。基本步骤： 1、取对数生长期的各组细胞，分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。 2、将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL 37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。 3、经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。 4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率 =（克隆数/接种细胞数）×100% 服务流程： 1）项目方案的确定，包括目的细胞、细胞处理方式及处理时间等。 2）细胞培养 3）克隆形成实验 4）克隆形成实验图片及实验报告服务周期：3～5周

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