克罗恩病动物模型的构建价格

提供商：MDL-北京百奥思科

服务名称：克罗恩病动物模型的构建

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克罗恩病是慢性炎症性肠病的一种,其发病机制一直以来是医学的研究热点及难点,选择合适的动物模型用于研究该病,对发掘潜在的治疗靶点,开发新的治疗药物显得尤为重要。

(1)造模方法选取成年大鼠，禁食不禁水48h，用腹腔注射戊八比妥钠麻醉，以新生儿胃管从肛门处插入肠道深约8cm，注入含三肖基苯磺酸(2,4,6-Trinitrobenzene sulfonicacid，TNBS)30mg的溶液0.9ml/只。该溶液由5％ TNBS 0.6ml和100％无水乙醇0.3ml组成。动物清醒后置清洁级环境中常规饲养，每日观察其神态活动、食欲体重、大便性状，定时处死，分离结肠，沿肠系膜剪开肠腔，作结肠外观的肉眼大体检查，同时在距肛门1、3、8cm处取结肠、横结肠、升结肠及病变最严重的肠段。常规石蜡包埋、切片、HE染色、用光学显微镜行组织形态学检查。

(2)模型特点模型动物注药1d后，出现懒动、厌食、腹泻，大便暗红色，隐血试验(++++)，体重下降，3d时症状最甚，5～6d后开始好转；动物腹泻一般可持续2周，大便隐血试验3周时仍表现为(+)～(++)。肉眼观察可见：注药后1d，结肠变褐黑色，肠壁充血、水肿，有多发大片糜烂灶，与周围组织轻度粘连；3d时，下段结肠肠壁严重节段性糜烂、坏死，有多个溃疡形成，肠壁与周围组织严重粘连；7d时，糜烂及坏死有所减轻，但出现多发性的深大溃疡，重度粘连；14d时，粘连减轻，不见糜烂及坏死，表面有类似于阿弗他样浅表溃疡及铺路石样改变，肠壁明显增厚，原有的深大溃疡已开始愈合，个别大鼠出现节段性的病变；21d时，肠段病变明显好转，溃疡愈合，可见愈合瘢痕，但肠壁增厚，病变肠道部位狭窄；28d时，肠壁已无溃疡，但肠壁仍较正常增厚。光镜下显示：注药后1d，出血性炎性病变弥漫性分布在黏膜及黏膜下层，上皮组织大量坏死，黏膜下严重水肿。大量的中性粒细胞及红细胞浸润，但肌层组织仍完整无损；3d时，病变进一步加重，出现全层透壁性炎症，形成深达肌层的大溃疡，炎症细胞浸润增多，但不见隐窝脓肿；7d时，可见明显裂隙状溃疡，全层透壁性炎症，浸润细胞主要为中性粒细胞及一些单核细胞、淋巴细胞，并开始出现血管增生，可见明显的肉芽组织，偶见隐窝脓肿；14d时，炎症较前减轻，溃疡变小变浅，黏膜下大量炎症细胞浸润，纤维结缔组织增生，有典型的肉芽肿形成，腺体杯状细胞减少，但腺体排列一般不变形，偶见息肉样改变；21d时，黏膜层基本正常，但仍有黏膜下大量炎症细胞浸润，可见已开始愈合的溃疡口，纤维结缔组织及血管增生明显；28d时，除病变最严重部位的切片黏膜下有大量单核细胞、淋巴细胞、浆细胞浸润，出现结节样物外，其他切片都只表现轻度黏膜下及固有层炎症。

(3)比较医学克罗恩病是一种病因未明的主要侵犯消化道的全身性疾病，属肠道多种非特异性炎症性疾病中的主要病种之一。当前较为流行的观点认为，当具有遗传易感性的机体针对胃肠道抗原物质的免疫耐受丧失时，自身免疫反应便成为克罗恩病发生和发展的关键性因素。本实验实际上是复制的一种免疫学的模型。TNBS本身是一种半抗原，它首先通过乙醇化学性作用，破坏肠黏膜屏障，然后进入局部肠道组织，与组织蛋白结合后成为完全性抗原，引发机体的免疫反应，导致肠道炎症的发生。其病理变化主要表现为：结肠肠壁黏膜表面有明显裂隙状溃疡，全层透壁性炎症，病变处肠壁变厚变硬，肠黏膜高度水肿，皱襞有类似于阿弗他样浅表溃疡及铺路石样改变，肠壁与周围组织严重粘连。这些变化与人类克罗恩病的病理特征存在着许多相似性。本模型的病变周期在28d以上，其中急性炎症期约1周。急性期主要表现为出血性炎，有大量中性粒细胞渗出，溃疡形成；慢性期则表现为全层透壁性炎，深大裂隙溃疡纤维结缔组织增生，大量炎症细胞浸润与肉芽肿形成。除组织学上与人类病变特点相当类似外，造模周期短、方法简便(只需一次性灌肠操作)、个体差异小、炎症持续时间较长、成模率高，亦是本模型的重要特点。作为用于验证、评判和筛选治疗克罗恩病的药物或活性物质疗效的手段之一，本模型应该有所作为。

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心肌梗死模型	脑卒中模型	肾缺血模型
心肌缺血再灌注模型	全脑缺血模型	肾缺血再灌注模型
心肌缺血和心肌梗塞模型	脑缺血再灌注模型	慢性肾衰模型
动脉粥样硬化模型	脑出血模型	肾炎模型
心律失常模型	脑梗模型	肾结石模型
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