Human Complement Factor D ELISA Kit

规格 ：96次

碧云天的Human Complement Factor D ELISA Kit (Human Complement Factor D Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人补体因子D酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Complement Factor D的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为29g/ml，与人的Coagulation Factor (凝结因子) II、Coagulation Factor X、Coagulation Factor XI及小鼠和大鼠的D因子等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
补体系统大约由30种游离血浆蛋白和相应的细胞表面受体组成，是免疫系统中的重要组成部分，参与病原体的清除过程。补体因子D (Complement Factor D)，又称Adipsin，是一种丝氨酸蛋白酶，属于补体系统活化过程中不可缺少的部分。人补体因子D首先合成253个氨基酸的前体蛋白，在生理条件下，成熟的D因子以无活性酶的形式存在，需要与其天然底物C3b-结合因子B结合，从而激活其催化活性。成熟的人D因子与黑猩猩、猕猴、猪和小鼠D因子分别具有98%、96%、84%和66%的氨基酸同源性。补体因子D在多种细胞和组织中都有所表达，例如单核细胞/巨噬细胞、肌肉组织、坐骨神经、子宫内膜、肾脏、小肠和脂肪细胞等。肥胖小鼠模型中D因子水平通常会出现减少。
血浆中补体因子D的水平受到肾脏的代谢调节，通过肾小球滤过和肾小管重吸收调节体内D因子水平。在肾功能衰竭的患者体内，游离补体因子D的水平会有所升高。补体因子D缺陷会导致补体系统活性降低，补体因子D基因缺陷的患者体内会出现补体因子D不足，从而导致复发性的细菌感染发生。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人Complement Factor D的浓度，其原理见图1。人Complement Factor D特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人Complement Factor D会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人Complement Factor D抗体后，生物素化抗人Complement Factor D抗体与人Complement Factor D结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人Complement Factor D浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人Complement Factor D浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PC088-1	人Complement Factor D抗体预包被板	8孔×12条
PC088-2	标准品稀释液(5X)	20ml
PC088-3	人Complement Factor D标准品	2-4瓶
PC088-4	人Complement Factor D生物素化抗体	10ml
PC088-5	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PC088-6	洗涤液(20X)	30ml
PC088-7	TMB溶液	10ml
PC088-8	终止液	5ml
PC088-9	封板膜(透明)	2张
PC088-10	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的试剂盒组分也不能混用。多个试剂盒同时检测时，请独立使用各个试剂盒中的试剂，请勿使用不同试剂盒中相同名称的组分。
充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。