Human BMP-2 ELISA Kit

规格 ：96次

碧云天的Human BMP-2 ELISA Kit (Human Bone Morphogenetic Protein 2 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人骨形成蛋白2酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的BMP-2的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为38pg/ml，与人BMP-2/BMP-7 Heterodimer、BMP-5、BMP-6、BMP-7、BMPR-IB、LAP、TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
骨形成蛋白2 (Bone Morphogenetic Protein 2, BMP-2)是TGF-β大家族中的一员。BMPs最初被认为是软骨和骨形成过程的蛋白调节因子，现在发现他们还能够参与多种组织和器官的胚胎形成和形态发生，还可以调节间叶细胞、上皮细胞、造血细胞和神经元细胞的生长、分化和凋亡。BMP-2具有多种功能，包括器官生成、骨形成和再生以及调节肢芽细胞发育。在胚胎发育过程中BMP-2也扮演重要角色。胚胎发育时，软骨和骨分化形成的一系列过程都受到BMP-2的影响。如果将小鼠BMP-2基因敲除还会导致胚胎死亡。
每一种BMP都是先合成前体蛋白，再经由加工得到成熟BMP，随后以二聚体的形式分泌出来。尽管同源二聚体是较为常见的形式，但也存在天然的异质二聚体，并且与同源二聚体具有相同的生物学活性。BMP-2是一种396个氨基酸的糖基化多肽，由19个氨基酸信号肽、263个氨基酸前导肽和114个氨基酸的成熟片段组成。成熟的BMP-2具有7个半胱氨酸残基和一个N连接糖基化位点，BMP-2预测分子质量为14kDa，但由于糖基化的发生，实际分子量能够达到18kDa。成熟的人、小鼠及大鼠BMP-2具有完全一致的氨基酸序列，BMP-2和BMP-4在氨基酸序列上具有92%的氨基酸同源性。
BMPs通过不同的异源低聚受体复合物实现信号传递。BMP-2受体包括I型受体：ALK-6/BMPR-IB、ALK-2/Act RI和ALK-3/BMPR-IA，以及II型受体BMP RII和Act RIIB。内皮素能够通过与I型受体中ALK-6/BMPR-IB 和ALK-3/BMPR-IA作用从而与BMP-2结合。BMP与受体结合后将通过Smad蛋白将信号直接传递至细胞核内。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人BMP-2的浓度，其原理见图1。人BMP-2特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人BMP-2会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人BMP-2抗体后，生物素化抗人BMP-2抗体与人BMP-2结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人BMP-2浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中人BMP-2浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PB045-1	人BMP-2抗体预包被板	8孔×12条
PB045-2	样品分析缓冲液	5ml
PB045-3	标准品稀释液	10ml
PB045-4	人BMP-2标准品	2-4瓶
PB045-5	人BMP-2生物素化抗体	10ml
PB045-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PB045-7	洗涤液(20X)	30ml
PB045-8	TMB溶液	10ml
PB045-9	终止液	5ml
PB045-10	封板膜(透明)	2张
PB045-11	封板膜(白色)	2张
-	说明书	1份

保存条件：
标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
注意事项：
由于标准品一般是冻干粉，在制备后需要严格校准，所以标准品的瓶数及每瓶标准品所需加入的稀释液体积请以实际收到的试剂盒及标准品标签上的标注为准。
洗涤液(20X)在低温下可能有结晶，如果发现有结晶，请室温水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
为保证标准品的精确性，标准品配制使用后，如果有剩余请勿再次使用。
TMB溶液请勿接触氧化剂和金属，否则容易失效。
加样时，请注意每个样品或标准品必须更换枪头，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取体积的误差。
由于本试剂盒均经过独立测试，所以请勿混用不同货号和不同批次的试剂盒组分，即使是同种试剂盒不同批次的充分混匀对保证反应结果的精准性很重要，在加液后请轻轻晃动整个96孔板，以保证混匀。
本试剂盒很多操作在室温进行，要求严格控制室温在25-28℃。温度低于25℃会导致最终检测到的吸光度显著下降。
洗涤过程非常重要，洗涤不充分会使精确度下降并导致结果误差较大。
检测标准品和样品时建议设置重复孔，以确保检测结果的可信度。
加样过程中须避免气泡的产生。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。