吉姆萨染色液规格

吉姆萨染色液规格

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品牌:研生

货号:YSRIBIO-C1392

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库存 :52

英文名 :Giemsa Stain Solution

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海研生

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ml

【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时,可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称:吉姆萨染色液规格
英文名称:Giemsa Stain Solution
产品规格:100ml

发货周期:1~3天
本品以进口的吉姆萨色素、甲醇为主要原料,含特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。吉姆萨染色液由吉姆萨贮存液(10×)和磷酸盐缓冲液组成,10×贮存液可以单独使用,也可以19混合成工作液后使用。

吉姆萨色素是由天青Ⅱ与伊红混合而成。吉姆萨染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,吉姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对细胞核着色偏深,核结构显色不佳,故吉姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。
一、一步法涂片染色
1、吉姆萨工作液的配制
按吉姆萨贮存液(10×)磷酸盐缓冲液=19混合,即取1份吉姆萨储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中充分混匀,即为吉姆萨工作液,该工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1-3分钟。
3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加吉姆萨工作液覆盖涂片,室温滴染。
4、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
5、干燥、镜检。
6、染色结果
嗜酸性颗粒————粉红色;
嗜碱性颗粒————紫蓝色;
中性颗粒—————淡紫色
二、两步法涂片染色
1、吉姆萨工作液的配制
按吉姆萨贮存液(10×)蒸馏水=14混合,即取1份的吉姆萨贮存液(10×)加入到4份的蒸馏水中充分混匀,即为吉姆萨工作液。吉姆萨工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定。
3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加适量吉姆萨工作液覆盖涂片,室温滴染。
4、加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置。
5、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
【培养指南】
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货,全国统一价格,本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类:
第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 2--6-酰黄嘌呤酶测试盒/XOD测试盒

 二测试盒/MDA测试盒
 盐阿莫洛芬红细胞NADH高铁血红蛋白还原酶测试盒
 3--2-烯二糖酶测试盒
 3,4-二酰胰蛋白酶测试盒
 十二酯胃蛋白酶测试盒
 3,4-二苄酰胆转移酶测试盒/CHAT测试盒
 间酰缩酶测试盒/ALD测试盒
 N-Boc-3-溴-糖激酶测试盒/HK测试盒
 1-羟-1-环已酯激酶测试盒/PK测试盒
吉姆萨染色液规格7香豆素羧(>98.0%(GC)(T))英文名(EN)3Chlorophenol,98%特价促销  规格(SP)25G

7屈螺英文名(EN)2,3,5Trimethylphenol,特价促销  规格(SP)25G
7依匹斯汀盐盐英文名(EN)2Chloronitrophenol,特价促销  规格(SP)5G
7羟香豆素英文名(EN)4Bromophbenol,特价促销  规格(SP)25G
7羟香豆素(标准品)英文名(EN)Cresol mixed isomers,特价促销  规格(SP)25ML
7羟多沙唑嗪英文名(EN)Phloroglucinol,特价促销  规格(SP)25G
7羟华法林英文名(EN)2Aminophenol,特价促销  规格(SP)100G
7羟蝶呤英文名(EN)4Chlorophenol,≥特价促销  规格(SP)100G
7羟喹平英文名(EN)2Chlorophenol,≥特价促销  规格(SP)100G
7羟利培英文名(EN)pCresol,特价促销  规格(SP)25G
7羟香豆素英文名(EN)mCresol,特价促销  规格(SP)100G
7羟香豆素;伞形花内(标准品)英文名(EN)oCresol,≥特价促销  规格(SP)100G
7羟香豆素羧(>98.0%(HPLC))英文名(EN)3,4Dimethylbenzaldehyde,98%特价促销  规格(SP)5G
7去表雄英文名(EN)4Isopropoxybenzaldehyde,特价促销  规格(SP)1G
70羟喜树(SN8)英文名(EN)4Bromo,5dimethoxybenzaldehyde,98%特价促销  规格(SP)5G
7喜树英文名(EN)2Benzyloxybenzaldehyde,98%特价促销  规格(SP)10ML
7喜树(标准品)英文名(EN)3,5Dibromobenzaldehyde,98%特价促销  规格(SP)1G
7喜树d3英文名(EN)4(Pyridinyl)benzaldehyde,98%特价促销  规格(SP)1G
操作步骤(仅供参考):
1、吉姆萨染色液规格贴壁细胞的消化
①吸除培养液,用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置 0.5~2min, 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足,则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000~2000g 离心 1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。


 

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