DNA Pull-down

DNA Pull-down

价格: ¥2000

产品详情

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提供商 :晶莱生物

服务名称 :RNA Pulldown、DNA Pull-down

规格 :实验服务

实验意义
核酸与蛋白质的互作是细胞功能的核心,包括蛋白质合成、mRNA组装等生命活动中重要的代谢过程,研究核酸与蛋白质的互作是研究生命科学的基本工具。

实验原理及步骤
RNA Pull-down:通过体外转录RNA并用生物素进行标记,然后与胞浆蛋白混合物共同孵育形成RNA-蛋白质复合物,然后用链霉亲和素标记的磁珠分离纯化该复合物(利用生物素与链霉亲和素的非共价亲和作用),洗脱后进行检测,如果检测蛋白为已知蛋白可通过WB进行鉴定,如果检测未知蛋白则可以结合质谱进行鉴定。流程为提取细胞胞浆蛋白样品液→体外转录合成生物素标记RNA→共孵育→磁珠纯化→洗脱得到互作蛋白→WB或质谱鉴定。
DNA Pull-down:通过合成标记有生物素的DNA片段,与细胞核蛋白混合物共同孵育形成DNA-蛋白质复合物,然后用链霉亲和素磁珠纯化,WB或者质谱进行检测鉴定。流程为提取核蛋白样品液→合成生物素标记DNA→共孵育→磁珠纯化→洗脱得到互作蛋白→WB或质谱鉴定。

结果展示
RNA Pull-down
 

 
DNA Pull-down


实验周期及交付标准
1. 实验周期:1-2个月
2. 交付标准:
RNA Pull-down:探针序列、X光片、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)
DNA Pull-down:探针序列、X光片、实验报告(实验步骤、试剂、仪器等)

需确认信息
1. 目的基因种属及ID号
2. 基因序列信息

3. 样本种属及类型
4. 样本数量
5. 分析要求

参考文献
[1] Chen R , Liu Y , Zhuang H , et al. Quantitative proteomics reveals that long non-coding RNA MALAT1 interacts with DBC1 to regulate p53 acetylation[J]. Nucleic Acids Research, 2017, 45(17):9947-9959.
[2] Tran D H , Shishido Y , Chung S P , et al. Identification of DNA-binding proteins that interact with the 5'-flanking region of the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry.[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2015, 116:94-100.
 

晶莱生物服务流程


晶莱生物实验服务项目

动物实验 细胞生物学 病理实验
消化系统模型 细胞培养 病理染色
胃酸分泌模型 普通细胞株 HE染色
脓毒症模型 细胞缺氧培养 油红O染色
胃溃疡模型 细胞培养+支架 番红固绿染色
胰腺炎模型 干细胞培养 Masson染色
肝纤维化模型 原代细胞分离/提取/培养 天狼猩红染色
DIO肥胖模型 细胞转染/病毒感染 PAS糖原染色
胆结石模型 Trans well共培养 阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型 细胞增殖 甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型 细胞计数 尼氏染色
急性肝损伤模型 生长曲线测定 LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型 存活曲线测定 普鲁士蓝染色
骨质疏松模型 ccK-8增殖检测 VG染色
糖尿病模型 MTT增殖检测 EVG染色
高尿酸血症模型 CFSE检测增殖-流式检测 VonKossa染色
呼吸系统模型 BrDU检测-免疫荧光法 刚果红染色
肺纤维化模型 细胞凋亡 苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型 Annexin V/PI流式检测细胞凋亡 Trap染色
急性肺损伤模型 WB检测凋亡相关蛋白 抗酸染色
哮喘模型 透射电镜观察凋亡小体 革兰氏染色
肺栓塞模型 Tunel染色(POD法,DAB显色) AB-PAS染色
支气管炎模型 Tunel(荧光法,含试剂盒) 亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型 DNA ladder法 苯胺蓝染色
慢性肾衰模型 细胞周期 荧光 DAPI染色
急性肾衰模型 细胞显微计数 普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型 PI染色 间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型 BrdU渗入法 银染
肾炎模型 免疫荧光染色 黑色素染色
子宫内膜异位症模型 PI流式检测细胞周期 镀银染色
心血管系统模型 细胞运动 PASM 六胺银染色
冠心病模型 Transwell检测细胞迁移 VG染色
心肌梗死模型 Transwell检测细胞侵袭 富尔根染色
心脏骤停模型 细胞划痕 亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型 细胞克隆 碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型 集落形成法/稀释铺板方法 Goldner三色法染色
白血病模型 软琼脂克隆法 PAS-萘酚磺S染色
高血压模型 毛细管克隆法 改良苯酚品红染色
神经系统模型 体外实验血管生成 网状纤维染色
脑卒中模型 磁珠分选细胞 β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型 流式分选细胞 镀银染色
脑出血模型 开机费 movat五色染色
脑损伤模型 单色 维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型 双色 免疫组化
帕金森模型 CBA多细胞因子流式检测 免疫组化预式
老年痴呆模型 组织/血液细胞制备 免疫组化正式
应激模型 组织单细胞制备 免疫荧光(石蜡-单标)
骨骼疾病模型 中性粒细胞提取 免疫荧光(石蜡-双标)
骨折模型 其他样本细胞制备(如血液等) 免疫荧光(石蜡-三标)
骨缺损模型 外周血PBMC分离 免疫荧光(冰冻-单标)
风湿免疫性关节炎模型 线粒体组学 免疫荧光(冰冻-双标)
骨关节炎模型 线粒体膜电位检测-流式法 制片前处理
五官疾病模型 线粒体膜电位检测-免疫荧光法 石蜡组织包埋
眼科疾病模型 线粒体ROS生物含量检测--流式 特殊包埋(细胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型 线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光 软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等)
皮肤疾病模型 线粒体通透性转换孔(mPTP) 骨组织脱钙(小)
皮肤损伤模型 溶酶体免疫荧光法 骨组织脱钙(大)
肿瘤疾病模型 线粒体+溶酶体共定位 骨组织EDTA脱钙(小)
原位瘤模型 内质网 骨组织EDTA脱钙(大)
转移瘤模型 线粒体钙瞬时变化检测-流式 石蜡白片
皮下植瘤模型 ATP检测 细胞爬片
  ADP检测  
  AMP检测  
     
流式 DNA/RNA半定量检测 基因编辑工具
组织细胞悬液处理 pcr检测mRNA 合成(3保1)片段/质粒/引物合成
细胞处理 microRNA检测 质粒载体构建
血液标本处理 LncRNA表达量的检测 过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养 CirRNA表达量的检测 shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测 凝胶电泳 过表达慢病毒载体构建包装
双色检测 基因合成 shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡 <300 过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期 300-1,500 shRNA腺病毒载体构建包装
  1500 - 5000 稳转细胞株
  >5000  
  特殊序列  
     
ELISA WB qPCR
组织匀浆处理 蛋白提取及定量一 RNA抽提
ELISA(不含试剂盒)48T/kit WB检测一(10孔膜/指标) mRNA引物设计及合成
ELISA(不含试剂盒)96T/kit 灰度值分析及作图一(10孔膜/指标) miRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit 蛋白提取及定量二 LncRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)96T/kit WB检测二(10孔膜/指标) CircRNA引物设计及合成
  灰度值分析及作图二(10孔膜/指标) mRNA RT-qPCR
    miRNA RT-qPCR
    LncRNA RT-qPCR
    CircRNA RT-qPCR

 


收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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