产品详情
文献和实验
相关推荐
提供商 :辉骏生物
服务名称 :RNA pull down MS
一、RNA pull down技术概述—辉骏生物RNA pull down是体外研究RNA与蛋白互作的重要技术。该技术通过体外转录靶RNA的一部分或全长,用生物素标记转录产物,再与蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素磁珠结合,从而把靶RNA结合蛋白从蛋白提取液中分离出来。复合物从磁珠上洗脱下来,通过western blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与靶RNA结合;通过质谱仪检测,可以筛选到与靶RNA结合的蛋白。
二、RNA pulldown实验原理—辉骏生物
生物素与链霉亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用;其中活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下,与已知的几乎所有生物大分子偶联。因此用生物素标记核酸后,利用生物素和链霉亲和素之间的亲和作用,可以纯化出各种生物大分子复合物。
RNA pull down实验是用生物素标记体外转录的靶RNA分子,再用链霉亲和素纯化出与靶RNA结合的蛋白复合体,洗脱得到RNA结合蛋白质。
三、RNA pull down_MS
简介:体外转录目的RNA的一部分或全长,用生物素标记转录产物,再与链霉亲和素磁珠孵育使之固定在磁珠上,用以“pull down”互作蛋白,纯化的产物蛋白经质谱鉴定,即可筛选到与目的RNA可能互作的蛋白。
应用:筛选与目的RNA互作的蛋白。
优势:1、体外直接转录目的RNA作为诱饵,避免了RNA互补探针导致的非特异性结果;
2、高效、通量大,一次性获得可能与目的RNA互作的蛋白。
四、RNA pulldown技术应用—辉骏生物
靶RNA结合蛋白的验证或筛选。
五、RNA pull-down技术流程—辉骏生物
RNA体外转录→与细胞/细胞核裂解液孵育→纯化互作蛋白→洗涤、洗脱互作蛋白→western-blot检测或质谱鉴定。
六、辉骏生物RNA pull-down实验服务信息
项目名称 | 客户提供 | 结果交付 |
RNA pull down MS | 1. 基因信息(物种、序列或ID) 2. 细胞系及培养信息 |
1. 原始结果图(input和洗脱液的SDS-PAGE图) 2. 质谱检索结果 3. 完整实验报告(包括实验材料、方法、结果分析) |
参考文献
1.Identification of RNA-Protein Interactions Through In Vitro RNA Pull-Down Assays. Methods MolBiol 1480:99-113(2016).
2.The long noncoding RNA ASNR regulates degradation of Bcl-2 mRNA through its interaction with AUF1. Sci Rep 6:32189 (2016).
3.Silencing of the mRNA-binding protein HuR increases the sensitivity of colorectal cancer cells to ionizing radiation through upregulation of caspase-2. Cancer Lett 393:103-112(2017).
更多实验项目
circRNA pull down
RIP(RNA结合蛋白免疫沉淀)
DNA pull down
RNA pull down
GST pull down
广州辉骏生物科技股份有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:10年