成脂诱导

成脂诱导

价格: ¥300

产品详情

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提供商 :晶莱生物

服务名称 :细胞成脂诱导实验服务

规格 :


实验操作流程:
成骨诱导培养液配备与诱导操作: 
1、准备含10%FBS的α-MEM培养液; 
2、在备好的α-MEM培养液中添加50μM 抗坏血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松; 
3、准备6孔培养板,将P4细胞按照5×103个/平方厘米的规格接种于原始α-MEM培养液中; 
4、待细胞长至基本融合后,更换上述制备完成的成骨诱导培养液; 
5、每三天换液一次,细胞长至7天时进行碱性磷酸酶染色; 
6、二十八天后再进行矿化结节的茜素红染色。 

素红染色方法介绍: 
1、去除细胞当前使用培养液,使用PBS清洗两次; 
2、使用10%甲醛室温固定15分钟,完成后使用重蒸馏水冲洗两次; 
3、按照1ml/孔加入40mM的茜素红染色液,室温孵育20min并轻微振荡; 
4、清除掉没有完全结合的染料,用重蒸馏水漂洗并振荡5min重复4次; 
5、倾斜放置2min,吸取多余的重蒸馏水;倒置显微镜观察拍照记录。

成脂诱导培养液配备与诱导操作: 
1、配置FBS10%含量的HG-DMEM培养液; 
2、在配制完成的HG-DMEM培养液中加入1μM地塞米松,10μg/ml胰岛素,200μM吲哚美辛和0.5mM IBMX; 
3、准备6孔培养板,将P4细胞按照2×104个/平方厘米的规格接种于原始HG-DMEM培养液中 
4、待细胞长至基本融合后,更换上述制备完成的成脂诱导培养液培养2天,在用只含有10μg/ml胰岛素的成脂维持培养液培养1天,如此交替循环培养至14天,使用红油O染色。 

红油O染色方法介绍:
1、去除细胞使用的当前培养液,使用PBS清洗两次; 
2、27.5%甲醛室温固定20分钟; 
3、重蒸馏水清洗3此,空气中干燥; 
4、加入0.5%的红油室温孵育一小时; 
5、配制70%乙醇溶液清洗3次; 
6、倒置显微镜观察拍照记录。
 
客户提供:
细胞种类和诱导分化细胞类型。

交付标准:
1、成功定向诱导分化的细胞。
2、完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)。

晶莱生物服务流程


晶莱生物实验服务项目
动物实验 细胞生物学 病理实验
消化系统模型 细胞培养 病理染色
胃酸分泌模型 普通细胞株 HE染色
脓毒症模型 细胞缺氧培养 油红O染色
胃溃疡模型 细胞培养+支架 番红固绿染色
胰腺炎模型 干细胞培养 Masson染色
肝纤维化模型 原代细胞分离/提取/培养 天狼猩红染色
DIO肥胖模型 细胞转染/病毒感染 PAS糖原染色
胆结石模型 Trans well共培养 阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型 细胞增殖 甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型 细胞计数 尼氏染色
急性肝损伤模型 生长曲线测定 LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型 存活曲线测定 普鲁士蓝染色
骨质疏松模型 ccK-8增殖检测 VG染色
糖尿病模型 MTT增殖检测 EVG染色
高尿酸血症模型 CFSE检测增殖-流式检测 VonKossa染色
呼吸系统模型 BrDU检测-免疫荧光法 刚果红染色
肺纤维化模型 细胞凋亡 苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型 Annexin V/PI流式检测细胞凋亡 Trap染色
急性肺损伤模型 WB检测凋亡相关蛋白 抗酸染色
哮喘模型 透射电镜观察凋亡小体 革兰氏染色
肺栓塞模型 Tunel染色(POD法,DAB显色) AB-PAS染色
支气管炎模型 Tunel(荧光法,含试剂盒) 亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型 DNA ladder法 苯胺蓝染色
慢性肾衰模型 细胞周期 荧光 DAPI染色
急性肾衰模型 细胞显微计数 普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型 PI染色 间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型 BrdU渗入法 银染
肾炎模型 免疫荧光染色 黑色素染色
子宫内膜异位症模型 PI流式检测细胞周期 镀银染色
心血管系统模型 细胞运动 PASM 六胺银染色
冠心病模型 Transwell检测细胞迁移 VG染色
心肌梗死模型 Transwell检测细胞侵袭 富尔根染色
心脏骤停模型 细胞划痕 亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型 细胞克隆 碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型 集落形成法/稀释铺板方法 Goldner三色法染色
白血病模型 软琼脂克隆法 PAS-萘酚磺S染色
高血压模型 毛细管克隆法 改良苯酚品红染色
神经系统模型 体外实验血管生成 网状纤维染色
脑卒中模型 磁珠分选细胞 β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型 流式分选细胞 镀银染色
脑出血模型 开机费 movat五色染色
脑损伤模型 单色 维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型 双色 免疫组化
帕金森模型 CBA多细胞因子流式检测 免疫组化预式
老年痴呆模型 组织/血液细胞制备 免疫组化正式
应激模型 组织单细胞制备 免疫荧光(石蜡-单标)
骨骼疾病模型 中性粒细胞提取 免疫荧光(石蜡-双标)
骨折模型 其他样本细胞制备(如血液等) 免疫荧光(石蜡-三标)
骨缺损模型 外周血PBMC分离 免疫荧光(冰冻-单标)
风湿免疫性关节炎模型 线粒体组学 免疫荧光(冰冻-双标)
骨关节炎模型 线粒体膜电位检测-流式法 制片前处理
五官疾病模型 线粒体膜电位检测-免疫荧光法 石蜡组织包埋
眼科疾病模型 线粒体ROS生物含量检测--流式 特殊包埋(细胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型 线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光 软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等)
皮肤疾病模型 线粒体通透性转换孔(mPTP) 骨组织脱钙(小)
皮肤损伤模型 溶酶体免疫荧光法 骨组织脱钙(大)
肿瘤疾病模型 线粒体+溶酶体共定位 骨组织EDTA脱钙(小)
原位瘤模型 内质网 骨组织EDTA脱钙(大)
转移瘤模型 线粒体钙瞬时变化检测-流式 石蜡白片
皮下植瘤模型 ATP检测 细胞爬片
  ADP检测  
  AMP检测  
     
流式 DNA/RNA半定量检测 基因编辑工具
组织细胞悬液处理 pcr检测mRNA 合成(3保1)片段/质粒/引物合成
细胞处理 microRNA检测 质粒载体构建
血液标本处理 LncRNA表达量的检测 过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养 CirRNA表达量的检测 shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测 凝胶电泳 过表达慢病毒载体构建包装
双色检测 基因合成 shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡 <300 过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期 300-1,500 shRNA腺病毒载体构建包装
  1500 - 5000 稳转细胞株
  >5000  
  特殊序列  
     
ELISA WB qPCR
组织匀浆处理 蛋白提取及定量一 RNA抽提
ELISA(不含试剂盒)48T/kit WB检测一(10孔膜/指标) mRNA引物设计及合成
ELISA(不含试剂盒)96T/kit 灰度值分析及作图一(10孔膜/指标) miRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit 蛋白提取及定量二 LncRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)96T/kit WB检测二(15孔膜/指标) CircRNA引物设计及合成
  灰度值分析及作图二(15孔膜/指标) mRNA RT-qPCR
    miRNA RT-qPCR
    LncRNA RT-qPCR
    CircRNA RT-qPCR

收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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