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库存 :348
英文名 :T4 RNA Ligase
保质期 :3年
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
保存条件 :-20℃
规格 :1000U|10000U
特别提示:包括T4 RNA连接酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:T4 RNA连接酶
英文名称:T4 RNA Ligase
产品货号:MT0055
产品规格:1000U|10000U
T4 RNA 连接酶催化3’→5’磷酸二酯键的形成,使核苷酸的5’-磷酸末端和3’-羟基末端连接,伴随着ATP水解为AMP和PPi。T4 RNA连接酶的作用底物包括单链RNA、DNA及二核苷焦磷酸,它可催化ssDNA和RNA的连接,相对于ssDNA,该酶对RNA分子的连接和环化效率更高。
产品应用:
·连接单链RNA和DNA
·RNA 3’末端标记
·RNA和DNA分子内和分子间连接
·合成单链寡脱氧核苷酸
·蛋白质中掺入非天然氨基酸
产品组成:
组分 | 1000U |
T4 RNA Ligase1(10 U/μl) | 100μl |
10×T4 RNA Ligase Buffer | 250μl |
10mM ATP | 100μl |
50% PEG 8000 | 500μl |
储存条件:-20℃可保存3年。
活性定义:1单位指在1×T4 RNA Ligase Buffer中,37℃条件下,30分钟内将1nmol的5’-[32P]rA16转化为磷酸盐不溶物质所需要的酶量。
注意事项:
1.1× T4 RNA Ligase Buffer:50mM Tris-HCl pH 7.5,10mM MgCl2,1mM DTT。该酶反应时需要加入终浓度1mM ATP。
2.最佳反应温度37℃,65℃ 10分钟可使该酶失活。
3.该酶的连接底物无论是ssDNA还是ssRNA均需要5’-磷酸化或预腺苷化。
4.该酶不能连接双链DNA或RNA。
5.加入终浓度5~10% PEG 8000或增加孵育时间可提高连接效率。
使用方法
1.ssDNA 和 RNA的连接反应
(1)配制如下反应体系(20μl)
RNA或ssDNA底物——————————-0.2~2pmol
10×Reaction Buffer————————2μl
PEG8000——————————————5~10%(wt/vol)
T4 RNA Ligase———————————1μl
ATP(10mM)—————————————2μl
灭菌水——————————————-up to 20μl
(2)37℃反应 30~60min,或25度反应1-2h。
(3)65℃15分钟,终止反应。
2.RNA 环化反应
(1)配制如下反应体系(20μl)
RNA——————————————10μM
10×Reaction Buffer——————2μl
PEG8000————————————5~10%(wt/vol)
T4 RNA Ligase—————————1μl
ATP——————————————20~50μM
Rnase inhibitor————————0.5μl
灭菌水————————————-up to 20μl
(2)37℃反应 30-60min,或25℃反应1-2h。
(3)65℃15分钟,终止反应。
我公司销售的T4 RNA连接酶北京厂家,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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