QuantiTect SYBR Green 荧光定量PCR试剂盒

库存 ：100

保质期 ：一年

英文名：QuantiTect SYBR Green PCR Kit (200)
中文名：QuantiTect SYBR Green 荧光定量PCR试剂盒 (200)
品    牌：Qiagen
货    号：204143

使用SYBR Green I进行两步法RT-PCR，用于基因表达分析

• 整合热启动，PCR特异性高
• 可靠定量检测低丰度转录本
• 准确定量检测各种起始量样本
• 提供含有或不含尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）两种包装
• 无需优化反应和循环条件

QuantiTect SYBR Green PCR Kit使用SYBR Green I通过两步法real-time RT-PCR对cDNA目标序列进行高特异性的定量检测。热启动和独特的实时定量PCR缓冲液确保了对cDNA目标序列高特异性和灵敏度的real-time定量检测。dNTP混合液含有dUTP，可选择性进行UNG处理。为便于使用，预混液可储存在2–8°C。

特点	参数
应用	Real-time quantification of genomic DNA or cDNA targets
反应类型	Real-time PCR and two-step RT-PCR
real-time或终点法PCR	Real-time
样本/目标类型	DNA, cDNA
单一或多重	Single
SYBR Green I或序列特异性探针	SYBR Green I
热循环仪	All real-time cyclers (e.g. LC, RG, ABI)
有/无ROX	With ROX

性能

QuantiTect SYBR Green PCR Kit在宽泛的范围内符合线性规律，可实现特异性定量检测（参见Specific quantification over a wide linear range）。与其他聚合酶相比，HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动，进一步提高了PCR反应的特异性。独特的PCR缓冲液和HotStarTaq DNA Polymerase，确保低丰度转录本的定量检测，低至5个拷贝的目标序列也可被准确检测（参见Highly specific amplification）。QuantiTect SYBR Green PCR Kit与QuantiTect Reverse Transcription Kit和QuantiTect Primer Assays配合使用，可获得灵敏、可靠的结果（参见Specific and sensitive quantification）。

QuantiTect SYBR Green PCR +UNG Kit中经特别优化的UNG溶液配合经验证的PCR预混液可有效避免PCR产物中的残留污染，并对靶序列进行可靠的定量检测（参见High specificity in real-time PCR）。

原理

QuantiTect SYBR Green PCR Kit含有优化的即用型预混液，可使用SYBR Green I对cDNA靶序列进行高特异性和灵敏度的real-time定量分析。预混液中的荧光染料SYBR Green I可对很多不同的靶序列进行分析，无需合成靶标特异性标记引物。独特的PCR缓冲液含有K⁺和NH₄⁺，能促使特异性引物退火，获得高PCR特异性和灵敏度（参见Specific primer annealing）。此外，HotStarTaq DNA Polymerase具有严格的热启动，可防止非特异性产物的形成。

QuantiTect SYBR Green PCR预混液含有dUTP，可在PCR前使用尿嘧啶DNA糖基化酶 （UNG）预处理，保证之前反应残留的PCR产物会影响后续的PCR反应。

2x QuantiTect SYBR Green PCR Kit的组份  

组份	特点	优势
HotStarTaq DNA Polymerase	95ºC孵育15分钟即可活化	室温下即可构建qPCR反应体系
QuantiTect SYBR Green PCR Buffer	NH4+和K+的平衡组合	特异性引物退火确保PCR结果可靠
dNTP mix	含有dUTP，会部分替代dTTP，可进行UNG处理	可选择进行UNG处理，以消除之前反应残留的PCR产物
SYBR Green I dye	DNA双链结合时，生成强烈的荧光信号	高度灵敏的定量检测
ROX dye	在Applied Biosystems或Agilent的PCR仪上进行荧光信号校准	可在需要ROX染料的PCR仪上进行准确的定量检测。不会干扰其他real-time PCR仪

操作流程

QuantiTect SYBR Green PCR Kit无需进行繁琐耗时的反应条件优化。只需简单地将引物、探针和cDNA模板加入到即用型PCR预混液中，即可开始反应（参见Two-step RT-PCR）。使用操作手册中的实验方案可在任何real-time PCR仪上得到快速、可靠的结果。如果需要，反应液可用尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）预处理，以去除之前反应残留的PCR产物。

为在两步法real-time RT-PCR中获得理想结果，我们推荐使用QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。此试剂盒可在20分钟内快速合成cDNA，并可去除基因组DNA污染。

QuantiTect SYBR Green PCR Kit配合QuantiTect Primer Assays可在基因表达分析中获得高度特异性的结果。基因组范围、生物信息学验证的引物对覆盖所有人类、小鼠、大鼠和其他各类生物基因。QuantiTect Primer Assays可在GeneGlobe网站上方便地订购。

应用