直结肠癌动物模型

提供商 ：晶莱生物

服务名称 ：直结肠癌动物模型

规格 ：实验服务

诱发性肿瘤动物模型制作方法相对简单，重复性好，可以在较短时间内大量复制，而且基本模拟癌变的过程，因此，在实验中应用较广。但是，由于诱发性肿瘤实验因存在环保问题而需防护设施，实验条件要求较高。

造模机制
AOM法  AOM是DMH在肝脏的代谢产物，作用过程与DMH相似，它通过DNA烷化，促进碱基的错误配对而致癌。这两种化学致癌物都可以诱发降结肠肿瘤，组织学表现类似人类散发性结肠癌。由于AOM相比DMH具有致癌作用稳定、高效的特点，现正被越来越多的研究者采用。

AOM联合DSS法  DSS是人工合成的一种硫酸多糖，将DSS溶解于水给敏感种系的小鼠或大鼠饮用，可引起以血便、溃疡和粒细胞浸润为特征的结肠炎症，其病理改变接近人类溃疡性结肠炎。DSS肠炎的发生可能与其影响DNA合成、抑制上皮细胞增生、破坏肠黏膜屏障、巨噬细胞功能障碍及肠道菌群失调等有关。研究发现，DSS所导致的炎症以Th1/Th2细胞功能失调为特征，造成急性肠炎，经过多个循环喂养动物也可产生慢性肠炎，并伴有一定的肠癌发生率。加之AOM自身对肠道的影响，两者联合可以诱发稳定的炎症性肠癌。

实验方法
AOM法  生理盐水配制成浓度为1.25g/L溶液，选用6周龄雌性ICR小鼠，10mg/kg体重每周一次，腹腔注射，连续应用4周，观察时间选择实验第36周，以肿瘤发生为观察终点。

AOM/DSS法  选用雌性ICR、C57BL/6J或Balb/e小鼠均可。通常选用相对分子质量为40 000的DSS。第1天小鼠腹腔注射7.5～12.5ms/ kg AOM，1周后饲喂(1％～3％)DSS1周，之后改为正常饮水14天为一个循环，共循环3次，称之为“四步法”。“两步法”与前者的区别在于将3次循环的 DSS处理以后不做特殊处理缩短为单次循环，共两步完成。
模型特点
AOM法 
①连续4周腹腔注射氧化偶氮甲烷10mg/kg为最佳的给药剂量，此最佳剂量与动物的饲养环境无关，剂量过高会导致动物死亡率升高。剂量过低会导致癌症程度较轻，不同的致癌剂最佳剂量取决于实验动物遗传背景和给药方式。
②每周腹腔注射氧化偶氮甲烷10mg/kg，连续4周，在第24周发生结肠癌的概率为100％。
③不同遗传背景小鼠对AOM的敏感程度不同，敏感性由强到弱的顺序为：BALB/C小鼠与ICR小鼠有相同的作用，对氧化偶氮甲烷最敏感，C57BL/6N小鼠其次。
④AOM诱导小鼠大肠癌的发生是一个长期的多阶段的过程，与人类大肠癌发生过程中细胞动力学病理组织学和分子特征方面的变化特点非常相似。

AOM/DSS法 
采用腹腔注射AOM(10mg/ kg)和饲喂2％DSS饮水处理雄性ICR小鼠后，可观察到炎症导致肿瘤形成不同时期的病理学改变。第3周有2/5的小鼠出现结肠管状腺瘤，第4周有2/5小鼠发生腺癌。此后，随着时间推移，肿瘤发生率逐渐增加，第6周100％小鼠发生腺癌。所有时间点都可观察到结肠不典型性增生。AOM/DSS模型通过结肠黏膜的炎症和不典型性增生使肠黏膜受损，促进肿瘤产生，伴有K-Ras和β-catenin基因突变、错配修复基因缺失和微卫星不稳定性改变。

需确认的信息
1. 模型种属（大鼠还是小鼠或是其他种属）
2. 动物体重有无要求，年龄有无要求
3. 雌雄有无要求
4. 模型构建具体方案
5. 取材要求（采血、取组织样本）

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