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文献和实验
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库存 :35
英文名 :详见说明书
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海邦景
保存条件 :低温冷藏
规格 :50管/48样
细胞生物学研究有以下几个方面。细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
产品名称:乳糖含量测试盒(HPLC)规格
英文名称:
产品规格:50管/48样
发货周期:1~3天
测定意义:
乳糖存在于哺乳动物的乳汁中,一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促进脑苷脂类和黏多糖类的生成,对幼儿智力发育具有重要作用。
测定原理:
利用示差折光检测器测定乳糖含量。
需自备的仪器和用品:
高效液相色谱仪、示差折光检测器、低速离心机、溶剂抽滤装置、超声波清洗器、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系1个,0.45μm)、钙柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可调式移液器、
使用方法:
1. 悬浮细胞,2000rpm离心5min收集细胞;对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短(过长细胞膜破碎,造成假阳性,过短,细胞黏连影响检测)最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,吸除胰酶消化液,加入细胞培养液终止消化,2000rpm离心5min收集细胞。
2. 4℃预冷PBS,洗涤细胞2次(2000rpm x 5min),收集细胞2~5×105 。
3. 离心弃上清,加入500μL结合缓冲液,轻轻吹打重悬细胞。
4. 加入5μL Annexin V-FITC,轻轻吹打混匀,加入5μL PI 轻轻吹打混匀,室温避光孵育5-15min。(PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,时间允许,可以在检测前5分钟加入PI)
5. 流式细胞仪检测或荧光显微镜观察。最好在1h内检测。
注意事项:
乳糖含量测试盒(HPLC)规格尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
Corticosterone AChE Tracer (500 dtn) Corticosterone AChE Tracer
5fluoro ADB (10 mg) methyl (R)2(1(5fluoropentyl)1Hindazole3carboxamido)3,3dimethylbutanoate
FITCC6D(OMe)E(OMe)VD(OMe)FMK FITCC6D(OMe)E(OMe)VD(OMe)FMK
Ketorolac (tromethamine salt) (25 g) (±)5benzoyl2,3dihydro1Hpyrrolizine1carboxylic acid, tris(hydroxymethyl)aminomethane salt; Toradol; Ketorolac (tromethamine salt)
Apocynin (10 g) 1(4hydroxy3methoxyphenyl)ethanone; Acetovanillone|Acetoguaiacone|NSC 6|NSC 2024; Apocynin
N,Ndicyclopropyl4((1,5dimethyl1Hpyrazol3yl)amino)6ethyl1methyl1,6dihydroimidazo[4,5d]pyrrolo[2,3b]pyridine7carboxamide BMS43
乳酸过氧化物酶,英文名或英文缩写:Lactoperoxidase from bovine milk,级别:0.2OD/each primer,规格:1克
9003聚酸Poly(acrylic acid)
Isomaltooligosaccharide低聚麦芽糖1克AR
3,5二水杨全 3,5Dibromosclicylcldqhydq 902
Histaminediphospate组胺嶙酸盐5克BR,98%
CBZD谷酸25克
pxenol:Water 250ml 国产
邻本二酸壬酯,英文名或英文缩写:DNP,级别:高,98%,规格:25克
高录醋钡(*) BcRIUM PqRCHLORcTq TRIHYDRcTq 10390
铝屑,英文名或英文缩写:Aluminum,级别:AR,99.5%,规格:250毫克
10280 选择性 APS 肉汤基础 250g/瓶 非动物源配方,用于分子生物学试 验中大肠杆菌的保存和培养 incubation media 10280 选择性 APS 肉汤基础 250g/瓶 非动物源配方,用于分子生物学试 验中大肠杆菌的保存和培养
10281 选择性 APS 超级肉汤基础 250g/瓶 非动物源配方,用于培养重组大肠 杆菌菌株,提高质粒产量 incubation media 10281 选择性 APS 超级肉汤基础 250g/瓶 非动物源配方,用于培养重组大肠 杆菌菌株,提高质粒
乳糖含量测试盒(HPLC)规格AntibioticAgarNO.2
真菌培养基 250(g) incubation media 真菌培养基 250(g)
法国科玛嘉显色培养基 1000ml/瓶
艾格琼脂250用于生产过程中无菌监测(Acumedia方法)incubationmedia艾格琼脂250用于生产过程中无菌监测(Acumedia方法)
AnaerobicAgar
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
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