FRET技术

价格： ¥1

提供商：艾柏森生物

服务名称：FRET技术

步骤	服务内容	服务描述
1	实验方案制定	根据客户提供信息，进行风险评估等，制定实验方案。
2	细胞培养	根据实验培养特定的细胞用于转染，观察检测分子在细胞内的相互作用；
3	细胞转染	构建质粒载体 CFP-A 和 YFP-B，将检测的 AB 蛋白分别偶联上荧光蛋白 CFP 和 YFP，并将两个质粒共转染到培养的细胞内
4	检测 FRET	质粒载体 CFP-A 和 YFP-B 转染细胞 10h、12h、18h、24h、36h、48h、72h 后检测，是否发生 Fret；
5	图像采集	确定 FRET 配对的激发波长，蓝光被调谐分别用于探测最大和最小的供体和受体信号，最大供体信号和最小受体信号对应的波长用于收集双表达细胞的 FRET 信号。调整激光变化，以便获取最大 CFP 信号和最小 YFP 信号的激发光波长，采集供体和受体图像，收集 FRET 信号。每个细胞 FRET 检测重复 3 次，每种转染至少完成 6 个细胞的 FRET 检测
6	数据处理	去除 FRET 信号中 DSBT 和 ASBT 的光谱串色信号；受体通路的 FRET 信号需要对供体受体光谱灵敏度的变化进行矫正、对自发荧光和光学噪声进行矫正；利用矫正系数对双标定细胞进行象素匹配矫正
	实验报告	上述各步骤详细实验结果；实验耗材等详细信息；可以为客户定制试验服务。