胶原酶I型价格

库存 ：51

英文名 ：Collagenase I

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海研生

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：100mg

【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
中文名称：胶原酶I型价格
英文名称：Collagenase I
产品规格：100mg
发货周期：1～3天
本品为I型胶原酶，≥250U/mgsolid，可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。
本品来源于溶组织梭菌（Clostridiumhistolyticum），是一种酶粗提物，不仅含有胶原酶（更准确的称法为梭菌蛋白酶A（clostridiopeptidaseA）），能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等，分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白，多糖和脂质，使得本品非常适用于组织消化。
胶原酶（Collagenase）是一种蛋白酶，一种肽链内切酶，能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列（该序列高频率出现在胶原中，很少发现于其他蛋白中）并切割该序列中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽，但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶，这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。
目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异，分为四种类型胶原酶I型，II型，III型和IV型，在应用上有所偏向
1）胶原酶I（TypeICollagenase）含有比较均匀的各种酶活力（包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性）。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备；
2）胶原酶II（TypeIICollagenase）含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；
3）胶原酶III（TypeIIICollagenase）含有较低的蛋白酶活性，常用于乳腺细胞的制备；
4）胶原酶IV（TypeIVCollagenase）含有低胰酶活性，通常用于胰岛细胞的制备，或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
酶活力单位定义
在37℃，pH7.5的条件下，5h内水解胶原产生相当于1μML-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。
储存条件4℃，有效期两年
操作步骤(仅供参考)：
1、贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
胶原酶I型价格待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
 (S)-(-)-2-羧环甘锌/甘络合锌/甘螯合锌/2水甘锌/Zinc Glycinate
 (三亚正)L-高精盐盐/L-Homoarginine hydrochloride
 5-溴-3-啶-2-酯N-酰-L-蛋/N-酰-L-/NAM
 正三溴化五肽胃泌素/五肽促胃素/N-(1,1-二氧)羰-β-酰-L-色酰-L-酰-L-门冬酰-L-酰/Pentagastrin
 3-频哪醇酯甘酰-脯酰-对对盐/GPDA
 3-羟酪盐/对羟盐盐/盐酪/Tyramine hydrochloride
 2--2-噻唑啉-4-羧色/3-（2-）吲哚/β-吲哚/2-(3-吲哚)/Tryptamine
 4-溴-1,8-萘4-马尿/对马尿/Sodium 4-aminohippurate
 2-(3,4-二)-5-羟色肌/5-羟色肌盐/5-羟色肌盐一水合物/5-HT
 4-溴-2-酰盐-L-白酰-2-/L-亮酰-2-盐盐/L-白酰-β-盐盐/L-Leucyl-2-naphthylamide hydrochloride
胶原酶I型价格2,2'二羟,4'二二(>90.0%(GC))英文名(EN)Methyl violet特价促销  规格(SP)25G
2,2'二羟二(>98.0%(GC))英文名(EN)Fast Black B Salt特价促销  规格(SP)25G
2,2'二羟二(>99.0%(GC))英文名(EN)Neodymium(III) chloride,≥99.特价促销  规格(SP)1G
2,2'二羟二(>98.0%(GC))英文名(EN)Fluorescein disodium salt,98.500.5%特价促销  规格(SP)25G
2,2'二羟偶(>98.0%(T))英文名(EN)2,4Dimethoxybenzaldehyde,98%特价促销  规格(SP)5G
2,2'二可宁(>98.0%(HPLC))英文名(EN)Sodium creatine phosphate dibasic tetr...特价促销  规格(SP)1G
2,2'二可宁二盐水合物(>98.0%(HPLC))英文名(EN)Silver diethyldithiocarbamate,特价促销  规格(SP)1G
2,2'二溴9,9,螺二[9H芴](>95.0%(GC))英文名(EN)Alizarin,特价促销  规格(SP)5G
2,2二(>95.0%(GC))英文名(EN)Sodium taurocholate hydrate,≥97.0%特价促销  规格(SP)1G
2,2'联勒皮英文名(EN)Alizarin yellow GG特价促销  规格(SP)25G
2,2'联嘧(>95.0%(GC))英文名(EN)Alizarin yellow R特价促销  规格(SP)25G
2,2'双(羟)二(>98.0%(GC))英文名(EN)2,6Dichloroindophenol,98%特价促销  规格(SP)5G
2,2'脱水尿苷英文名(EN)Acid alizarin blue B特价促销  规格(SP)25G
2,3',4,4'四羟二(>90.0%(GC)(T))英文名(EN)Alkali blue 6B特价促销  规格(SP)10G
2,3,6,7,10,11六()并菲(>98.0%(HPLC))英文名(EN)Murexide特价促销  规格(SP)25G
2,3,6,7,10,11六三亚(>95.0%(GC))英文名(EN)oCresolphthalein特价促销  规格(SP)25G
2,3,6,7,10,11六羟三亚水合物(>95.0%(HPLC))英文名(EN)oCresolphthalein complexon特价促销  规格(SP)25G
2,3,6,7,10,11六溴三亚(>98.0%(T))英文名(EN)Xylenol Orange特价促销  规格(SP)25G
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。