Tunel细胞凋亡检测试剂盒（FITC）规格价格

库存：25

英文名：Tunel cell apoptosis detection kit（FITC）

CAS号：详见说明书

保质期：详见说明书

供应商：上海研生

保存条件：低温冷藏

规格：10次/20次/50次

实验报告：
一、Tunel细胞凋亡检测试剂盒（FITC）规格分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

中文名称：Tunel细胞凋亡检测试剂盒（FITC）规格
英文名称：Tunel cell apoptosis detection kit（FITC）
产品规格：10次/20次/50次
发货周期：1～3天
检测原理细胞在发生凋亡时，会在生理生化和细胞形态上发生一系列变化，在凋亡中晚期，激活的DNA内切酶会切断核小体间的基因组DNA，DNA会被降解成为约180bp-200bp的片段，而正常或者增殖细胞很少发生DNA断裂。利用这个差异，用脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT酶）把FITC标记的dUTP标记到断裂DNA片段的3'-OH末端，然后进行荧光显微镜或流式细胞仪检测，这个方法被称为TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法细胞凋亡检测。
产品优势和特点TUNEL细胞凋亡检测试剂盒，集成了不同产品的诸多特长，形成独特优势和特点
·高活性的重组TdT突变体酶----该转移酶的比活是其他试剂盒里TdT活力的10倍，同样情况下，不被标记的3'-OH末端可以顺利标记上荧光，因此检测灵敏度更高；
·经反复优化的标记反应底物----降低了荧光基团相邻后可能造成聚集和淬灭的效果，从而提高检测灵敏度，同时减少非特异性反应；
·更精确的实验数据----试剂盒提供的PI核染料，可以将全部标记和未标记细胞的DNA着色，并在488nm波长激发光下发出红色荧光，从而得以判断凋亡细胞占总细胞比例；
·一步染色，使用方便----只需一步染色反应，染色完成后洗涤即可观察，约1-2个小时即可完成；
·应用范围广----既可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
检测方法荧光显微镜或流式细胞仪
样本类型石蜡包埋组织切片、组织冰冻切片、细胞涂片以及细胞悬液
保存条件-20°非无霜冰箱中，避免反复冻融。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
4-溴-2-N,N-双（2-羟）-2-/N,N-(2-羟)-2-/N,N-二(2-羟)-2-/2-(二醇)/BES
3--2-3-N-（1，1-二-2-羟）-2-羟盐/3- (1,1-二-2-羟)-2-羟/AMPSO sodium salt
2-氧3-N-（1，1-二-2-羟）-2-羟/奎诺二烯酯/喹诺二烯酯/AMPSO
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邻三3-(N-啉)-2-羟盐/3-吗啉-2-羟/MOPSO sodium salt
2',3'-O-异叉肌苷3-(N-啉)-2-羟/3-吗啉-2-羟/3-(4-吗啉)-2-羟/MOPSO
5--2-羟-3-啶3-(N-啉)盐/3-(N-吗啉)/3-(N-吗啉)盐/MOPS sodium salt
2,3,4-三羟2--2--1,3-二醇/1,1-二(羟)/1,3-二羟-2--2-/二醇/2--2--1,3-二醇/AMPD
2--5-羟啶N-(2-羟)嗪-N-(2-)/4-(2-羟)-1-嗪/羟嗪/N-(2-羟)嗪-N-2-/HEPES
1,10-二三(2-羧)盐盐/三(2-羰)盐盐/三(2-酰)盐盐/三(2-羧)盐盐/三(2-酰)盐盐/TCEP
Tunel细胞凋亡检测试剂盒（FITC）规格2Bromo5hydroxypyridine2溴5羟55717403
2Amino6ethoxybenzothiazole26并噻唑94451
TOSARGOHN对酰L精1159155
4Formylphenylboronic acid4酰87199175
Lithium benzoate锂553548
3Fluoro4hydroxybenzonitrile34羟405049
Gastrodin天麻素62499278
2(Chloromethyl)pyridine hydrochloride2()6959473
TUNGSTEN(VI) CHLORIDE钨13283017
2,3,4,5TETRAFLUOROBENZOTRIFLUORIDE2,3,4,5四三654535
5Aminoquinaldine5喹哪啶54408503
(Z)9Octadecenoic acid methyl ester油112629
DLProlineDL脯609369
Sildenafil西地139755832
Jack beans meal巨豆
薯蓣皂苷;Dioscin 19057604 订购|咨询规格 20mg
松萝;(+)Usniacin 7562610 订购|咨询规格 20mg
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乔松素;Picembrin 480397 订购|咨询规格 20mg
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牛蒡子苷元;Arctigenin 7770787 订购|咨询规格 20mg
牡荆素葡萄糖苷;glucosylvite 76135825 订购|咨询规格 20mg
雷内;Triptophelide 74285862 订购|咨询规格 20mg
洛伐他汀;Lovastatin 75330755 订购|咨询规格 20mg
卡比多巴;S()Carbidopa 28860959 订购|咨询规格 20mg
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芥子苷一水;Sinigrin m 64550885 订购|咨询规格 20mg
黄芩素;Baicalein 491678 订购|咨询规格 20mg
古伦宾;Columbin 546974 订购|咨询规格 20mg
腐 ;1,4Diamibuta 110601 订购|咨询规格 20mg
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。