MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书

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CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海研生

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：250T|500T|1000T

操作步骤(仅供参考)：
1、MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书贴壁细胞的消化
①吸除培养液，用无菌 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
②加入少量 源叶生物 Trypsin-EDTA solution，略盖过细胞即可，室温放置 0.5～2min， 不同的细胞消化时间有所不同。
③显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变
化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的  完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
④如果发现消化不足，则加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落， 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000～2000g 离心 1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2、组织的消化不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
中文名称：MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书
英文名称：
产品规格：250T|500T|1000T
发货周期：1～3天
MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒是应用新型的水溶性甲臢化合物[3-(4，5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁)，内盐；MTS]快速高灵敏度检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测产品。
MTS被细胞生物还原成一种可溶于组织培养基的甲臢化合物，新陈代谢活跃的活细胞内的脱氢酶类将MTS转化成液态可溶的甲臢化合物，这种甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上测量，而不需要另外作处理。由490nm测量的吸收值所表示的甲臢产物的数量与培养物中活性细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数量呈线性关系。
MTS溶液可以直接加入到细胞样品中，不需要预配各种成分，MTS溶液很稳定，对细胞没有毒性，可以长时间孵育细胞。MTS法测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的灵敏度高，无放射性，检测细胞增殖实验的灵敏度比其它方法如MTT,XTT和WST-1高。
储存条件2-8℃避光保存。长期不用的分装后于-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期一年。
【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【复苏的原则】
产品名称快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
细胞的种类：
第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 3-(4-氧)-3-羰酯性蛋白酶/Alkaline proteinase
 6-糖精风味酶/风味蛋白酶/Flavourzyme
 溴酰对-β-D-喃半乳糖苷/4--β-D-喃半乳糖苷/PNPG
 2,3-二-6-氧腈对-α-D-喃半乳糖苷/4--α-D-喃半乳糖苷/PNPG
 3-溴-2,6-二对-β-D-喃葡萄糖苷/4--β-D-喃葡萄糖苷/PNPG
 N-对-α-D-喃葡萄糖苷/4--α-D-喃葡萄糖苷/PNPG
 6-溴-1,2,3,4-四5-溴-6-3-吲哚-β-D-半乳糖苷/ Red-Gal/Mag-gal/Magenta-gal
 铋(III) (metals basis)抗坏血酶/ASO/Ascorbate Oxidase
 2-溴-3--5-啶木聚糖酶/Xylanase
 溶壁酶/细胞溶解酶/Lyticase/Lysing Enzymes
MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒说明书(2FURYL)GLYOXYLIC ACIDα代21467705
METHYL 2METHYL4HYDROXY2HTHIENO[2,3E]1,2THIAZINE3CARBOXYLATE1,1DIOXIDE替诺昔康物59804250
Caesium fluoride铯13400130
OLEOYL CHLORIDE油酰112776
NA硅101白色担体
Sodium periodate高7790285
FmocTrp(Boc)OHNalpha芴羰Nin叔羰L色143824786
3Hydroxycinnamic acid反式3羟肉桂14755023
5,6,7,8TETRAHYDROISOQUINOLINE5,6,7,8四异36556066
(E)4[2(3,4,5trimethoxyphenyl)ethenyl]Phenol(E)4'羟3,4,5三二116519007
2,4,6Trichloropyrimidine2,4,6三嘧啶3764010
Ethoxyquin91532
Ferrocenecarboxylic acid二茂铁1271427
2Methoxyethoxymethyl chloride23970216
4[4(tertButoxycarbonyl)piperazino]benzoic acid4(4羧)嗪1羧叔162046664
(+)2 13054870 订购|咨询  规格 100mg
L缬  订购|咨询  规格 100mg
唑林  订购|咨询  规格 100mg
萝巴新 483045 订购|咨询  规格 100mg
金银花  订购|咨询  规格 0.5g
左卡汀 541151 订购|咨询  规格 100mg
百合  订购|咨询  规格 1g
罗通定  订购|咨询  规格 100mg
蛇床子  订购|咨询  规格 0.5g
对 555168 订购|咨询  规格 50mg
精  订购|咨询  规格 100mg
  订购|咨询  规格 100mg
尿素  订购|咨询  规格 50mg
二羟啡6  订购|咨询  规格 20mg
胰高血糖素  订购|咨询  规格 IU/19ng