产品详情
文献和实验
相关推荐
库存 :24
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海研生
保存条件 :低温冷藏
规格 :100T
中文名称:细胞凋亡形态学检测试剂盒价格英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
细胞凋亡形态学检测试剂盒可用于细胞凋亡检测,也可用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色,染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。
本试剂盒细胞染料是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。能少许进入正常细胞膜,使其染上低蓝色,而凋亡细胞的膜通透性增强,因此进入凋亡细胞中的染料比正常细胞的多,荧光强度要比正常细胞中要高,此外,凋亡细胞的染色体DNA的结构发生了改变从而使该染料能更有效地与DNA结合,并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到损伤不能有效地将染料排出到细胞外使之在细胞内积累增加等都使凋亡细胞的蓝色荧光增强。
染料的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;染料和双链DNA结合后,最大激发波长为350nm,最大发射波长为461nm。本染色试剂盒可直接用于活细胞或组织染色,也可用于固定细胞或组织染色。
储存条件2-8℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期一年。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.细胞凋亡形态学检测试剂盒价格用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
以下是公司正在热销产品:
胎牛血清50ml/XQ-B0050代酰/酰/Ethanethioamide
胎牛血清100ml/XQ-B0100SDNA核苷染/SYBR Green 1 替代物/SDNA-Nucleic acids stain dye
胎牛血清500ml/XQ-B0500宝石橙蛋白染色试剂/SYPRO orange protein stain
20-120kDa预先染色分子量MARK利英克盐/二四代铵/四二络铵/雷氏盐/利英纳克盐/赖纳克氏盐/铵/Reinecke salt
甜橙油盐付玫瑰/副品红/盐副蔷薇/盐副玫瑰/付玫瑰盐盐/付品红/盐副品红/性红9/4-(4-)(4-亚-2,5-二烯-1-亚)单盐盐/Parafuchsin hydrochloride
硬脂酰乳/二酰脲/2,4,6-三羟嘧啶/嘧啶三/二酰缩脲/巴比土/Barbituric acid
7,8-二羟黄钨/钨水合物/钨水合物/Phosphotungstic acid hydrate
醌钼/十二钼/钼/Phosphomolybdic acid hydrate
水溶性霍霍巴油锌试剂/5-(2-羧)-1-(2-羟-5-)-3-单盐/2-羧-2′--5′-单盐/邻2-(2-羟-5-偶)亚苄肼单盐/锌单盐/Zincon
XDA-1B大孔树脂荧光桃红B/性红92/荧光桃红/溴四荧光素/焰红B/石南红/玫瑰红/焰红染料B/标记红/Phloxine B
细胞凋亡形态学检测试剂盒价格4VINYLCYCLOHEXENE DIOXIDE3环7二环[4,1,0]庚106876
5Methylthianaphthene5并14315141
KAEMPFERITRIN苷482382
4Hydrazino7nitrobenzofurazan4肼72,1,3并恶二唑90421786
TITANIUM钛7440326
Ethyl ziram二二代14324551
Pazufloxacin mesilate帕珠沙星163680771
Rosmarinic acid迷迭香20283925
Triethyl orthopropionate原三115800
Mineral oil体石蜡8042475
PNITROPHENYL 2ACETAMIDO2DEOXYALPHADGALACTOPYRANOSIDE42酰2脱αD半糖苷23646686
3,4Dimethoxy3cyclobutene1,2dione3,4二3环1,2二5222731
CESIUM CHROMATE 99.9+%铯56320902
(+/)2,2'Bis(diphenylphosphino)1,1'binaphthyl(±)2,2'双(二)1,1'联98327878
Copper quinolate8羟铜10380286
重楼皂苷I 50773416 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
知母皂苷A3 41059794 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
利血平 50555 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
参皂苷Re 51542564或52286596 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
β谷甾 83465 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
柚皮素 480411 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
葡萄糖 29031194 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
虎杖苷 27208806 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
黄豆黄苷 40246104 订购|咨询 规格 HPLC≥98%;20mg
维生素B12 68199 订购|咨询 规格 20mg
脱吴茱萸 67909493 订购|咨询 规格 10mg
骨二 63283363 订购|咨询 规格 20mg
女贞苷 260413625 订购|咨询 规格 20mg
瑞香素 2034697 订购|咨询 规格 20mg
去吴茱萸 67909493 订购|咨询 规格 10mg
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
上海研生实业有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:7年