一步式RT-PCR Mix

库存 ：26

英文名 ：详见说明书

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海一研

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：50次

荧光定量PCR试剂盒技术：
产品仅用于科研本实用新型专利技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒，包括盒体，盒体由上盒体和下盒体组成，上盒体的底面上设有限位凸起，下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽，且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖，侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾，下盒体的上端边缘处设有环形凸起，两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上；凹槽的内部设有固定杆，固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架；下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型专利技术通过将盒体分为上下组合的两个部分，并将两个部分通过侧盖连接，即可保证试剂盒的便携性，同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。

产品名称：一步式RT-PCR Mix
规格：50次
编号：EY00P4786
分类：探针荧光定量PCR试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
主要特征：
准确性高：创新的ASL Probe修饰探针和高特异性SNP Ligase有力的保证了分型的准确率。
重复性好：该分型体系经过反复验证和优化，获得的数据重复性极好。
低成本：无需合成大量昂贵的双标探针。
无需高质量的基因组DNA：粗提物即可进行实验操作。便于快速大量制备基因组DNA。通常386个全血DNA可在30min内制备完毕。
操作简单：简单易懂、结果清晰的分型判断标准，在PCR仪充足的情况下，单人可轻松完成超过3860个SNP数据分析。
应用：
分子标记辅助育种
遗传疾病诊断
致病候选基因研究
药物筛选研究
群体遗传研究

产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针
相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法  ：
 2-ΔΔCt
前提：目标序列和内参序列的扩增效率接近100％且偏差在5％以内
  1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值：
    ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
    ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
  2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值：
         ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
  3、计算表达水平比率：
                    2 –ΔΔCT=表达量的比值

几种传统荧光定量PCR方法简介：
产品仅用于科研
1）一步式RT-PCR Mix内参照法：
　　在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
2）竞争法：
　　选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3）PCR－ELISA法：
　　利用生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
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Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020)
别 名 P-SHIP1 (Tyr1020); Inositol polyphosphate 5 phosphatase of 145kDa; 4; 5-trisphosphate 5-phosphatase 1; hp51CN; hSHIP; Inositol polyphosphate 5 phosphatase 145kDa; Inositol polyphosphate 5 phosphatase; Inositol polyphosphate 5 phosphatase D; Inositol polyphosphate-5-phosphatase of 145 kDa; INPP 5D; INPP5D; INPP5D protein; MGC104855; MGC142140; MGC142142; p150 ship; p150Ship; Phosphatidylinositol 3,4,5 trisphosphate 5 phosphatase 1; Phosphatidylinositol-3; SH2 containing inositol 5 phosphatase; SH2 containing inositol phosphatase isoform b; SH2 domain containing inositol 5' phosphatase 1; SH2 domain containing inositol phosphatase 1; SH2 domain-containing inositol phosphatase 1; SH2 domain-containing inositol-5''-phosphatase 1; SHIP 1; SHIP-1; SHIP1; SHIP1_RAT; Signaling inositol polyphosphate 5 phosphatase SIP 145; Signaling inositol polyphosphate 5 phosphatase SIP145; SIP 145; SIP-145; SIP145.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 免疫学 信号转导 激酶和磷酸酶 t-淋巴细胞
蛋白分子量 predicted molecular weight：134kDa  
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from rat SHIP1 around the phosphorylation site of Tyr1020
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
Anti-Smac/DIABLO
别 名 0610041G12Rik; DBLOH_HUMAN; DBOH; DBOH; diablo; Diablo homolog (Drosophila); Diablo homolog (Drosophila); Diablo homolog; Diablo homolog mitochondrial; DIABLO S; DIABLO S; Direct IAP binding protein with low pI; Direct IAP binding protein with low pI; Direct IAP-binding protein with low pI; FLJ10537; FLJ25049; mitochondrial; Mitochondrial Smac protein; Second mitochondria derived activator of caspase; Second mitochondria derived activator of caspase; Second mitochondria-derived activator of caspase; SMAC 3; Smac; Smac protein; Smac protein; SMAC3; SMAC3;
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 细胞凋亡 新陈代谢 线粒体
蛋白分子量 predicted molecular weight：21kDa  
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Smac C-terminus
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
一步式RT-PCR Mix足蛋白Elisa检测试剂盒英文名称：NPHN ELISA Kit英文缩写：NPHN
肿瘤抗原Elisa检测试剂盒英文名称：RAGE ELISA Kit英文缩写：RAGE
结核蛋白4Elisa检测试剂盒英文名称：NPHP4 ELISA Kit英文缩写：NPHP4
素Elisa检测试剂盒英文名称：REN ELISA Kit英文缩写：REN
素Elisa检测试剂盒英文名称：Renin ELISA Kit英文缩写：Renin
损伤分子1Elisa检测试剂盒英文名称：Kim1 ELISA Kit英文缩写：Kim1
损伤分子1Elisa检测试剂盒英文名称：Kim-1 ELISA Kit英文缩写：Kim-1
胱素5Elisa检测试剂盒英文名称：NPHP5 ELISA Kit英文缩写：NPHP5
内标对荧光定量PCR的影响：
1．实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2．内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标，则PCR反应变为双重PCR，双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争，尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时，这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的，所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因，传统定量方法虽然加入内标，但仍然只是一种半定量的方法。