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文献和实验
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库存 :51
英文名 :详见说明书
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海一研
保存条件 :低温冷藏
规格 :50只/套
产品仅用于科研产品名称:Coronavirus(CoV)科研通用RT-PCR试剂盒
规格:50只/套
编号:EY00P4770
分类:探针荧光定量PCR试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
荧光定量PCR试剂盒技术:
本实用新型专利技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒,包括盒体,盒体由上盒体和下盒体组成,上盒体的底面上设有限位凸起,下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽,且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖,侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾,下盒体的上端边缘处设有环形凸起,两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上;凹槽的内部设有固定杆,固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架;下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型专利技术通过将盒体分为上下组合的两个部分,并将两个部分通过侧盖连接,即可保证试剂盒的便携性,同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
主要特征:
准确性高:创新的ASL Probe修饰探针和高特异性SNP Ligase有力的保证了分型的准确率。
重复性好:该分型体系经过反复验证和优化,获得的数据重复性极好。
低成本:无需合成大量昂贵的双标探针。
无需高质量的基因组DNA:粗提物即可进行实验操作。便于快速大量制备基因组DNA。通常386个全血DNA可在30min内制备完毕。
操作简单:简单易懂、结果清晰的分型判断标准,在PCR仪充足的情况下,单人可轻松完成超过3860个SNP数据分析。
应用:
分子标记辅助育种
遗传疾病诊断
致病候选基因研究
药物筛选研究
群体遗传研究
产品特点
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,*程度地避免了非特异扩增;
2. 反应缓冲液经充分优化,反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟;
3. 抗干扰能力强,反应重复性高,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
特异性荧光标记:
TaqMan法
TaqMan探针的特性:
(1)5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)
(3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, R与Q分开,发荧光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针
相对定量通过内标定量:
内标(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在细胞中的表达量或在基因组中的拷贝数恒定,受环境因素影响小,内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
相对定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目标序列和内参序列的扩增效率接近100%且偏差在5%以内
1、用内参基因的CT值归一目标基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校准样本的ΔCT值归一试验样本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、计算表达水平比率:
2 –ΔΔCT=表达量的比值
几种传统荧光定量PCR方法简介:
1)Coronavirus(CoV)科研通用RT-PCR试剂盒内参照法:
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
2)竞争法:
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
3)PCR-ELISA法:
利用生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。
内标对荧光定量PCR的影响:
1.产品仅用于科研实时荧光定量PCR无需内标实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:
1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
2.内标对实时荧光定量PCR的影响若在待测样品中加入已知起始拷贝数的内标,则PCR反应变为双重PCR,双重PCR反应中存在两种模板之间的干扰和竞争,尤其当两种模板的起始拷贝数相差比较大时,这种竞争会表现得更为显著。但由于待测样品的起始拷贝数是未知的,所以无法加入合适数量的已知模板作为内标。也正是这个原因,传统定量方法虽然加入内标,但仍然只是一种半定量的方法。
以下是公司正在促销打折产品:
Anti-SAPK3/MAPK12/p38gamma
别 名 MAP kinase 12; MAP kinase p38 gamma; MAPK 12; Mapk12; Mitogen Activated Protein Kinase 12; ERK6; ERK 6; ERK-6; Extracellular signal-regulated kinase 6; Mitogen activated protein kinase 3; Mitogen activated protein kinase p38 gamma; Mitogen-activated protein kinase 12; Mitogen-activated protein kinase p38 gamma; MK12_HUMAN; P38 GAMMA; P38GAMMA; PRKM12; SAPK 3; SAPK3; Stress Activated Protein Kinase 3; Stress-activated protein kinase 3.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶 细胞粘附分子 细胞分化
蛋白分子量 predicted molecular weight:42kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SAPK3/MAPK12/p38gamma
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
Anti-phospho-SAPK3 (Thr183+Tyr185)
别 名 p-SAPK3(phospho-Thr183+Tyr185); MAP kinase 12; MAP kinase p38 gamma; MAPK 12; Mapk12; Mitogen Activated Protein Kinase 12; ERK6; ERK 6; ERK-6; Extracellular signal-regulated kinase 6; Mitogen activated protein kinase 3; Mitogen activated protein kinase p38 gamma; Mitogen-activated protein kinase 12; Mitogen-activated protein kinase p38 gamma; MK12_HUMAN; P38 GAMMA; P38GAMMA; PRKM12; SAPK 3; SAPK3; Stress Activated Protein Kinase 3; Stress-activated protein kinase 3.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Guinea Pig
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶 细胞粘附分子 细胞分化
蛋白分子量 predicted molecular weight:42kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human SAPK3 around the phosphorylation site of Thr183+Tyr185 [EM(p-T)G(p-Y)VV]
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
Coronavirus(CoV)科研通用RT-PCR试剂盒表皮调节素Elisa检测试剂盒英文名称:EREG ELISA Kit英文缩写:EREG
表皮膜蛋白3Elisa检测试剂盒英文名称:EMP3 ELISA Kit英文缩写:EMP3
表达于SiSo细胞系的受体结合型肿瘤抗原Elisa检测试剂盒英文名称:RCAS1 ELISA Kit英文缩写:RCAS1
表面活性物质关联蛋白AElisa检测试剂盒英文名称:SPA ELISA Kit英文缩写:SPA
表面活性物质关联蛋白BElisa检测试剂盒英文名称:SPB ELISA Kit英文缩写:SPB
表面活性物质关联蛋白CElisa检测试剂盒英文名称:SPC ELISA Kit英文缩写:SPC
表面活性物质关联蛋白DElisa检测试剂盒英文名称:SPD ELISA Kit英文缩写:SPD
表面活性物质关联蛋白JElisa检测试剂盒英文名称:SPJ ELISA Kit英文缩写:SPJ
上海一研生物科技有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:8年