猪鼻甲粘膜成纤维细胞多少钱价格

品系：详见说明书

ATCC Number ：PT-K75

细胞类型：贴壁生长

肿瘤类型：详见说明书

CAS号：详见说明书

供应商：上海谷研

库存：46

注册证号：详见说明书

英文名：PT-K75

生长状态：37℃，5%CO2，CM1-1培养液。CM1-1培养液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培养液，含谷氨酰胺，含酮酸钠。

年限：详见说明书

运输方式：详见说明书

器官来源：详见说明书

是否是肿瘤细胞：是

细胞形态：CM1-1培养液中，贴壁，成纤维细胞样

免疫类型：详见说明书

物种来源：详见说明书

相关疾病：详见说明书

组织来源：详见说明书

规格：详见说明书

实验材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个；人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个，细胞培养瓶1个
5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块；
7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；
8、酒精灯1台；

产品名称	猪鼻甲粘膜成纤维细胞多少钱
种属	PT-K75
价格	来电可享受优惠

资源名称猪鼻甲粘膜成纤维细胞
种属：PT-K75
类型：贴壁生长
形态：CM1-1培养液中，贴壁，成纤维细胞样
分离基物：PT-K75细胞系是来自两个新生仔猪的鼻甲粘膜
提供形式：复苏形式：T25培养瓶1瓶；或者冻存形式：2ml冻存管2支，干冰费另计。
安全等级：1
模式：菌株未知
应用领域细胞用于猪巨细胞病毒(CMV)的传播co-cultivation 1:1与猪(CMV)感染的细胞。
培养方法
传代方法：将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，则吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约2min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可分2~4皿培养；
生长条件：37℃，5%CO2，CM1-1培养液。CM1-1培养液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培养液，含谷氨酰胺，含酸钠。
生长特性：1:3传代，细胞长到80%的密度，大概需要一周的时间，细胞长的慢。伸展的比较大，细胞量少
存储条件：冻存则用6mL冻存液（90%FBS+10%DMSO）终止消化，吹打均匀，分为6支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存。

收到细胞后，在倒置镜下好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况：
（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。
猪鼻甲粘膜成纤维细胞多少钱具体步骤如下：
1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒放于37℃培养箱1-3分钟预热，之后翻转培养瓶10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。
实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测，反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质，在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水（1:9）稀释至 1×备用。
免DNA提取PCR试剂盒100次Cell Lysate PCR Mix特价促销-20℃保存
绵羊肺腺瘤病毒PCR检测试剂盒50T特价促销低温运输，-20℃保存
绵羊痘病毒PCR检测试剂盒50T特价促销低温运输，-20℃保存
糜蛋白酶原1gChymotrypsinogen特价促销4℃保存
咪唑溶液，2M100mLImidozol Solution特价促销常温保存
咪唑25gImidazole特价促销常温保存
咪唑10gImidazole特价促销室温干燥保存
酶水解酪素100gCasein Enzymatic Hydrolysate特价促销室温干燥保存
梅毒螺旋体PCR检测试剂盒50T特价促销低温运输，-20℃保存
梅迪一维斯纳病毒PCR检测试剂盒50T特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 PPP2R42 ugpOTB7 PPP2R4特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 PPP2R1A2 ugpOTB7 PPP2R1A特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 PLK12 ugpOTB7 PLK1特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 NOXA12 ugpOTB7 NOXA1特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 NFKBIL22 ugpOTB7 NFKBIL2特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 NCF22 ugpOTB7 NCF2特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 IFIT32 ugpOTB7 IFIT3特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 HSPA1A2 ugpOTB7 HSPA1A特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 FKBPL2 ugpOTB7 FKBPL特价促销低温运输，-20℃保存
pOTB7 FKBP42 ugpOTB7 FKBP4特价促销低温运输，-20℃保存
猪鼻甲粘膜成纤维细胞多少钱产品规格：500ml
发货周期：1～3天
用途：
快速脱钙液，比JYBL-Ⅰ脱钙液更迅速，对组织亦有损失。
注意事项：
主要由甲酸、福尔马林等组成，一般24h完成脱钙。
储存条件：室温，12个月