pNFκB-TA-luc (报告基因质粒)

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英文名 ：pNFκB-TA-luc (报告基因质粒)

保质期 ：一年

供应商 ：上海信裕生物科技有限公司

保存条件 ：-20℃保存。

pNFκB-TA-luc (报告基因质粒)

pNFκB-TA-luc (报告基因质粒)是信裕生物自行研发的用于检测NFκB转录活性水平的报告基因质粒。pNFκB-TA-luc是以信裕生物的pGL6-TA质粒为模板，在其多克隆位点插入了多个NFκB结合位点，可以高灵敏度地检测NFκB的激活水平。
pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有的可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
pNFκB-TA-luc质粒的主要信息如下：

Base pairs	5651
NFκB response element (κB)	26-65
Minimal TA promoter (pTA)	88-110
luc2 reporter gene	152-1804
SV40 late poly(A) signal	1839-2060
SV40 early enhancer/promoter	2108-2526
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region	2551-3345
Synthetic poly(A) signal	3370-3418
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3485-3504
ColE1-derived plasmid replication origin	3742
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4533-5393
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5498-5651
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5600-5619

pNFκB-TA-luc质粒的图谱如下：

pNFκB-TA-luc的多克隆位点及NFκB response element的详细图谱如下：

	BglI KpnI NheI NFkB response elememt
1	GGCCTAACTG	GCCGGTACCG	CTAGC GGGAA	TTTCCGGGAA	TTTCCGGGAA
	CCGGATTGAC	CGGCCATGGC	GATCG CCCTT	AAAGGCCCTT	AAAGGCCCTT
	BglII HindIII Minimal TA promoter
51	TTTCCGGGAA	TTTCC AGATC	TGCAGAAGCT	TAGACAC TAG	AGGGTATATA
	AAAGGCCCTT	AAAGG TCTAG	ACGTCTTCGA	ATCTGTG ATC	TCCCATATAT

pNFκB-TA-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pNFκB-TA-luc)包括：

Aat II	Afl II	Asc I	Ase I	Bsa I	BsaA I	BsiW I	BspM II
BssH II	Eco72 I	EcoR I	EcoR V	Mlu I	Nde I	Nru I	PaeR7 I
PflM I	Pme I	Pml I	Psp1406 I	PspA I	Rsr II	Sac I	Sma I
SnaB I	Spl I	Srf I	Tth111 I	Vsp I	Xcm I	Xho I	Xma I

pNFκB-TA-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pNFκB-TA-luc once)包括：

Sfi I	GGCCN,NNN`NGGCC	9		BstB I	TT`CG,AA	3421
Bgl I	GCCN,NNN`NGGC	9		Sal I	G`TCGA,C	3435
Acc65 I	G`GTAC,C	15		Afl III	A`CRYG,T	3685
Asp718	G`GTAC,C	15		ApaL I	G`TGCA,C	3999
Kpn I	G,GTAC`C	19		HgiE II	ACCNNNNNNGGT -1/13	4264
Nhe I	G`CTAG,C	21		Not I	GC`GGCC,GC	4505
Bgl II	A`GATC,T	67		BstX I	CCAN,NNNN`NTGG	4529
Hind III	A`AGCT,T	77		BstE II	G`GTNAC,C	4532
BsrG I	T`GTAC,A	643		Ahd I	GACNN,N`NNGTC	4607
Dra III	CAC,NNN`GTG	1299		Bsu36 I	CC`TNA,GG	4963
Gsu I	CTGGAG 21/19	1532		Pvu I	CG,AT`CG	4977
Bpm I	CTGGAG 22/20	1533		Sac II	CC,GC`GG	5001
Mun I	C`AATT,G	1979		Bst1107 I	GTA|TAC	5117
BamH I	G`GATC,C	2072		Xca I	GTA|TAC	5117
Stu I	AGG|CCT	2505		Spe I	A`CTAG,T	5436
EcoN I	CCTNN`N,NNAGG	3026		BsmA I	GTCTC`/9	5448
BsiC I	TT`CG,AA	3421		BsmB I	CGTCTC 7/11	5449

pNFκB-TA-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下：
RVprimer3(5600-5619):
CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
pNFκB-TA-luc的全序列信息：D2207-pNFkappaB-TA-luc-seq.txt 
包装清单：

产品编号	产品名称	包装
XY-2207-1μg	pNFκB-TA-luc (报告基因质粒)	1μg
XY-2207-100μg	pNFκB-TA-luc (报告基因质粒)	100μg
—	说明书	1份

保存条件：
-20℃保存。
注意事项：
本质粒未经信裕生物书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：
1. 首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl， 共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。
3. pNFκB-TA-luc可用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用信裕生物的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)。
4. TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的可以激活NFκB的试剂，可以用作pNFκB-TA-luc报告基因检测时的阳性对照。