血管紧张素转换酶测定试剂盒(连续监测法)说明书

库存 ：56

英文名 ：Angiotensin-converting enzyme Assay Kit

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海研生

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：R1：50ml×3

中文名称：血管紧张素转换酶测定试剂盒(连续监测法)说明书
英文名称：Angiotensin-converting enzyme Assay Kit
产品规格：R1：50ml×3
发货周期：1～3天
发货周期：1～3天
检测指标：血管紧张素转换酶;ACE
本试剂盒用于血清或血浆中血管紧张素转换酶（ACE）的体外定量测定。FAP在波长340nm处有最大吸收峰，应用血管紧张素转换酶酶解N-(3[2-Furyl]Acryloy)-phe-gly-gly变成FAP及GG，从而发生吸光度上的下降变化。可在特定波长处测定吸光度的变化速率而计算出样本中血管紧张素转换酶的活力。FAPGG—ACE→FAP+GG。高度溶血可导致正的误差。参考值5～52U/L（此数据仅供参考，建议各实验室建立自己的参考值范围）。
血管紧张素转换酶（ACE）的主要功能是转化血管紧张素Ι为血管紧张素Π，后者有升高血压的作用，大多数结节病活动期ACE活性升高。血清ACE主要来源于肺毛细血管内皮细胞，急性肺损伤时ACE可发生显著变化，血清ACE变化可作为衡量各种因素所致肺损害程度的重要指标。
储存条件：2～8℃，有效期一年。
样本要求：不溶血的血清或血浆，血浆只能用肝素抗凝，不可使用EDTA抗凝。
线性范围：0~150U/L（判定依据：r2≥0.990）
性能指标：
试剂空白吸光度：A340nm（1cm光径）≥0.7
试剂空白吸光度变化率：ΔA/min（1cm光径）≤0.005
线性范围：0~150U/L（判定依据：r2≥0.990）
准确度：测定均值在该批质控品规定的偏差范围内
精密度：批内CV≤6.0%；批间相对极差≤10.0%
灵敏度：试剂检测下限≤5.1U/L
实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤：
1．血管紧张素转换酶测定试剂盒(连续监测法)说明书用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
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血管紧张素转换酶测定试剂盒(连续监测法)说明书Toxic shock syndrome toxin3-吡磺酸
Receptor II for the Fc region of immunoglobulin G2-基酸
Receptor I for the Fc region of immunoglobulin G二胺基基烯酰胺
anti SA antibody苦豆
papillomavirus 18 antibody槐定
papillomavirus 16 antibody槐果
Matrix Metalloproteinase 141-(3-氯基)嗪盐...
soluble CD283-羟基酸
Poliovirus IgM antiobody5-颉草酸
Poliovirus IgG antiobody吩嗪基硫酸盐
注意事项：
      尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
      如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
      染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
      如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
      荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
      用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
      需自备PBS。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。