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文献和实验
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库存 :47
英文名 :Cortex phellodendri
CAS号 :详见说明书
保质期 :详见说明书
供应商 :上海博湖
保存条件 :低温冷藏
规格 :50T
产品名称:黄柏LAMP鉴定试剂盒进口试剂英文名称:Cortex phellodendri
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
美芬诺酮 Mephenoxalone 质量规格:>98% 人硫酸类肝素(HS)ELISA检测试剂盒Humanheparansulfate,HSELISAKit 96T/48T
大豆卵磷脂(高) Lecithin 质量规格:HPLC>98%,BR 大鼠腺病毒抗体(FL/K87-Ab)试剂盒 Rat Adenovirus Aibody,FL/K87-Ab ELISA Kit
蛋黄卵磷脂 Lecithin from egg 质量规格:BR 英文名称Rathemeoxygenase-1ELISAKit大鼠血红素氧合酶1(HO-1)规格:96T/48T
维兰特罗 Vilanterol;GW642444 质量规格:>98%,吸入型长效β2激动剂 胱蛋白酶抑制剂(CystatinC)定量检测试剂盒50
PD98059 PD-98059 质量规格:>98%,MEK抑制剂 ELISAKitINS人胰岛素规格:48T/96T
PLX4720 PLX-4720 质量规格:>98%,B-RafV600E抑制剂 小鼠激活素A(Activin A)ELISA试剂盒 ,英文名: Activin A ELISA Kit
N,N-羰基二咪唑 1,1'-Carbonyldiimidazole 质量规格:>98% 鸡单疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)ELISA检测试剂盒ChickenHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-AbELISAKit 96T/48T
LY2835219 LY2835219 质量规格:>98%,CDK4 和CDK6选择性抑制剂 人Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)试剂盒 Human procollagen type III,HPCⅢ ELISA kit
LEE011 LEE011 质量规格:>98%,高度特异性CDK4/6抑制剂 英文名称MousesCD86ELISAKit小鼠sCD86(sCD86)规格:96T/48T
MG132,蛋白酶体抑制剂 MG-132 质量规格:>98%,proteasome抑制剂 冰冻切片组织GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
黄柏LAMP鉴定试剂盒进口试剂地奈德标记13C3 Desonide - Labeled 13C3 质量规格:美国进口 英文名称RatET-1Elisakit大鼠内皮素1(ET-1)Elisakit规格:96T/48T
L-顺式-盐酸地尔硫卓 L-cis-Diltiazem • HCl 质量规格:美国进口 英文名称RatETaR大鼠内皮素受体A规格:96T/48T
地尔硫卓 Diltiazem 质量规格:美国进口 英文名称RatETaR大鼠内皮素受体A规格:96T/48T
去乙酰地尔硫卓-d3 Desacetyl Diltiazem-d3 质量规格:美国进口 英文名称RatF1+2ELISAKit大鼠凝血酶原片段F1+2规格:96T/48T
O-去甲基地尔硫卓 O-Desmethyl Diltiazem 质量规格:美国进口 英文名称RatFBELISAKit大鼠纤维蛋白原(FB)规格:96T/48T
去乙酰地尔硫卓 Desacetyl Diltiazem 质量规格:美国进口 英文名称RatFBELISAKit大鼠纤维蛋白原(FB)规格:96T/48T
去[5-(2-二甲氨基)乙基]地尔硫卓 Des[5-(2-dimethylamino)ethyl] Diltiazem 质量规格:美国进口 英文名称RatFIIELISAKit大鼠凝血因子II(FII)规格:96T/48T
N,N-去二甲基地尔硫卓盐酸盐 N,N-Didesmethyl Diltiazem Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RatFIIELISAKit大鼠凝血因子II(FII)规格:96T/48T
O-去乙酰-N-去甲基地尔硫卓 O-Desacetyl-N-desmethyl Diltiazem 质量规格:美国进口 英文名称RatFIXELISAKit大鼠凝血因子IX(FIX)规格:96T/48T
N-去甲基地尔硫卓盐酸盐 N-Desmethyl Diltiazem Hydrochloride 质量规格:美国进口 英文名称RatFIXELISAKit大鼠凝血因子IX规格:96T/48T
英文名称RatEpithelialneuophilactivatingpeptide-78大鼠上皮中性粒细胞活化肽(ENA-78)规格:96T/48T 萘普酮-d3 Nabumetone-d3 质量规格:美国进口
英文名称RatEpithelialneuophilactivatingpeptide-78大鼠上皮中性粒细胞活化肽(ENA-78)规格:96T/48T DL-4-羟基-2-酮戊二酸二钠盐 DL-4-Hydroxy-2-ketoglutarate disodium salt 质量规格:美国进口
英文名称RatET-1大鼠内皮素1(ET-1)规格:96T/48T 3(R,S)-羟基去氧孕烯 3(R,S)-Hydroxy Desogestrel 质量规格:美国进口
英文名称RatET-1大鼠内皮素1(ET-1)规格:96T/48T 地奈德标记13C3 Desonide - Labeled 13C3 质量规格:美国进口
英文名称RatETaR大鼠内皮素受体A规格:96T/48T L-顺式-盐酸地尔硫卓 L-cis-Diltiazem • HCl 质量规格:美国进口
英文名称RatETaR大鼠内皮素受体A规格:96T/48T 地尔硫卓 Diltiazem 质量规格:美国进口
英文名称RatF1+2大鼠凝血酶原片段F1+2规格:96T/48T 去乙酰地尔硫卓-d3 Desacetyl Diltiazem-d3 质量规格:美国进口
英文名称RatFB大鼠纤维蛋白原(FB)规格:96T/48T O-去甲基地尔硫卓 O-Desmethyl Diltiazem 质量规格:美国进口
英文名称RatFB大鼠纤维蛋白原(FB)规格:96T/48T 去乙酰地尔硫卓 Desacetyl Diltiazem 质量规格:美国进口
英文名称RatFII大鼠凝血因子II(FII)规格:96T/48T 去[5-(2-二甲氨基)乙基]地尔硫卓 Des[5-(2-dimethylamino)ethyl] Diltiazem 质量规格:美国进口
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
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