ZJ103 Omni-Rapid ™快速蛋白定量试剂盒

规格 ：500次（微孔）

Omni-Rapid™快速蛋白定量试剂盒
Omni-Rapid™Protein Assay Kit
本产品冰袋运输； 即用型BSA标准品 -20℃保存，其它组分4℃保存，保质期12个月。

货号规格
goodZJ103     500次(微孔)

产品内容
 

组分	体积
试剂A	100 mL
试剂B	3 mL
即用型BSA标准品①( 0 μg/mL )	1 mL
即用型BSA标准品②(125 μg/mL)	1 mL
即用型BSA标准品③(250 μg/mL)	1 mL
即用型BSA标准品④(500 μg/mL)	1 mL
即用型BSA标准品⑤(750 μg/mL)	1 mL
即用型BSA标准品⑥(1000 μg/mL)	1 mL
即用型BSA标准品⑦(1500 μg/mL)	1 mL
即用型BSA标准品⑧(2000 μg/mL)	1 mL

产品特点
g d简单快速——室温5 min完成显色反应；
g d方便快捷——提供即用型标准品，省去繁琐的稀释步骤；
g d准确性高——变异系数远小于考马斯亮蓝染色法；
g d线性范围宽——灵敏，检测范围：20~2000 μg/mL；
g d兼容性好——与大多数金属离子、螯合剂及去污剂兼容性较好。

产品简介
goodOmni-Rapid™快速蛋白定量试剂盒的原理与传统BCA蛋白定量法类似，但采用了一种不同于BCA(Bicin-choninic Acid)的全新特殊的螯合剂，从而实现了对蛋白质浓度进行快速、稳定、灵敏的测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽键能与Cu²⁺形成络合物，将Cu²⁺还原成Cu⁺，Cu⁺与螯合物结合，从而发生颜色反应。本试剂盒中的螯合剂可敏感特异地与Cu⁺结合，只需室温孵育5 min即可形成稳定的橙黄色水溶性复合物，而传统BCA法则需在37℃下孵育30 min才可完成颜色反应。该橙黄色的复合物在480 nm处有强光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有一系列浓度的蛋白质标准品溶液(BSA溶液)，即取即用，无需稀释，方便快捷。

使用说明
good◈以微孔酶标仪法为例：
gooddd1. 配置显色工作液：
gooddd1. a. 计算显色工作液总量：
goodgoodgoodd工作液总量 = (BSA标准品样本个数＋待测样本个数)×复孔数×每个样本显色工作液体积
gooddd1. a. 举例：BSA标准品样本个数为8个，待测样本个数3个，复孔数3个。
goodgoodgoodd显色工作液总量 = (8个BSA标准品样本＋3个待测样本)×3个复孔×200 μL(每个样本工作液体积) = 6.6 mL
gooddd1. b. 根据计算出的显色工作液需要总量，将试剂A和试剂B按照50:1的体积比，配制显色工作液，充分混匀。
gooddd1. b. 注意：1） 试剂B刚加入试剂A时，会出现灰蓝色沉淀，但只需混匀几秒钟，沉淀就会消失，形成透亮的绿色溶液；
gooddd1. b. 注意：2）建议工作液现用现配，在室温下，工作液会逐渐变为深绿色，但只要在1.5 h内使用，对定量的准确性不会造成影响；
gooddd1. b. 注意：3） 由于加样可能存在误差，建议配制BCA工作液时，多配制1~2个孔。

gooddd2. 定量检测 
gooddd3. （1）分别取 即用型BSA标准品①~⑧ 各20 μL加到96孔板中( BSA标准品 使用前须充分溶解摇匀)；
 

孔号	1	2	3	4	5	6	7	8
添加物	标准品①	标准品②	标准品③	标准品④	标准品⑤	标准品⑥	标准品⑦	标准品⑧
体积（μL）	20	20	20	20	20	20	20	20
BSA终浓度（μg/mL）	0	125	250	500	750	1000	1500	2000

gooddd3. （2）用1×PBS或0.9%生理盐水将样品适当稀释(可以多作几个梯度，如2倍、4倍、8倍稀释)，加20 μL到96孔板的样品孔中；
gooddd3. （3）各孔加入200 μL显色工作液，充分混匀，盖上96孔板盖，室温孵育5min，即可进行检测；
gooddd3. （3）注意：由于颜色反应速度较快，须保证在20~30 min之内完成读值。如果必须在30 min后才能读值，可提前加入50 μL 1 M HCl终止反应。
gooddd3. （4）用酶标仪测定每个样品及BSA标准品的A480，注意要减去空白对照( 标准品① ＋工作液)的A480；
gooddd3. （5）绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。
gooddd3. （3）注意：数据处理时需要去除明显错误的值。待测样品浓度可以从标准曲线中查得, 实际浓度需要乘以样品的稀释倍数。如果是计算机绘制的曲线，可以从计算机给出的线性方程式计算出待测样品的浓度。

注意事项
good1. 本产品可以采用酶标仪(微孔检测法)或者分光光度计(试管检测法)测定蛋白浓度，如使用普通的分光光度计测定，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少；
good2. 建议每次测定蛋白样品时，都须绘制标准曲线，以获得准确数据；
good3. 完成室温孵育5 min后，须在20~30 min内完成检测，否则会影响蛋白定量的准确度；
good4. 如待测样品中含较多的干扰物质（具体见附表），可采用其它蛋白定量产品；
good5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；
good6. 本产品仅限科研使用。

干扰物质附表
 

化合物	耐受浓度	化合物	耐受浓度
盐/缓冲液		去垢剂
ACES, pH 7.8	25mM	Brij-35	5.0%
Bicine, pH 8.4	20mM	Brij-58	1.0%
Borate	50mM	Na Deoxycholate(DOC)	5.0%
Calcium chloride in TBS, pH 7.2	10mM	Octyl β-glucoside	5.0%
Na-Carbonate/Na-Bicarbonate, pH 9.4	0.1M	Span-20	0.5%
Cesium bicarbonate	100mM	TritonX-100	5.0%
CHES, pH 9.0	100mM	Triton-X-114, riton-X-305,Triton-X-405	1.0%
Na-Citrate	75mM	Tween-20, Tween-60, Tween-80	5.0%
MOPS, pH 7.2	100mM	CHAPS	5.0%
Cobalt chloride in TBS, pH 7.2	0.8mM	CHAPSO	5.0%
EPPS, pH 8.0	100mM	Zwittergent 3-14	1.0%
Ferric chloride in TBS, pH 7.2	10mM	螯合剂
Glycine•HCl, pH 2.8	100mM	EDTA	10mM
Ammonium sulfate	Ø	Sodium citrate	200mM
Guanidine•HCl	4M	还原剂
HEPES, pH 7.5	100mM	2-mercaptoethanol	Ø
Imidazole, pH 7.0	12.5mM	Dithiothreitol (DTT)	Ø
MES, pH 6.1	100mM	N-acetylglucosamine in PBS, pH 7.2	10mM
MES (0.1M), NaCl (0.9%), pH 4.7	Undiluted	糖类
Nickel chloride in TBS, pH 7.2	10mM	Glucose	10mM
PBS; Phosphate (0.1 M), NaCl (0.15 M), pH 7.2	Undiluted	其它
		A-cetone	10%
PIPES, pH 6.8	100mM	Acetonitrile	10%
RIPA lysis buffer: 50 mM Tris, 150 mM NaCl, 0.5% DOC, 1% NP-40, 0.1% SDS, pH 8.0	Undiluted	Aprotinin	10mg/L
		DMF	10%
		DMSO	10%
Sodium acetate, pH 4.8	200 mM	Ethanol	10%
Sodium azide	0.2%	Glycerol (fresh)	10%
Sodium bicarbonate	100mM	Hydrochloric acid	100mM
Sodium chloride	1 M	Leupeptin	10mg/L
Sodium citrate, pH 4.8 or pH 6.4	200mM	Methanol	10%
Sodium phosphate	100mM	N/A
Tricine, pH 8.0	25mM
Triethanolamine, pH 7.8	25mM
Tris	250mM
TBS: Tris (25 mM), NaCl (0.15 M), pH 7.6	Undiluted
Tris (25 mM), Glycine (192 mM), pH 8.0	1:2 dilution

 

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