ISOSPIN Cell & Tissue RNA（从动物细胞和组织提取RNA试剂盒）

从动物细胞和组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Cell & Tissue RNA

 

 

 

         

 

 

 

 

◆特点

 

•　高纯度RNA

离心法去除杂物和硅基质膜上的DNase I 处理能提取出高纯度RNA。

•　无需使用过滤器进行前处理

无需使用过滤器对样品均匀化或过滤。本试剂盒用离心法去除杂物沉淀。

•　无需苯酚、氯仿

无需苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。

•　包装附有DNase I

试剂盒内含有DNase I （RNase free），无需另外购买。

 

 

◆产品列表

 

 

ISOSPIN Cell & Tissue RNA (50次用量)

 

产品	包装	保存	备注
PT Extraction Buffer （组织用）	30 ml x 1 支	室温
C Extraction Buffer （细胞用）	30 ml x 1 支	室温
PT Binding Buffer	40 ml x 1 支	室温	含有乙醇
PT Wash1 Buffer	40 ml x 1 支	室温	含有乙醇（清洗液）
PT Wash2 Buffer	40 ml x 1 支	室温	含有乙醇（清洗液）
DNase I (RNase free)	2,000 units x 1 支	－20°C
10 x DNase I Buffer	1 ml x 1 支	室温/ －20°C
ddWater (RNase free)	1 ml x 8 支	室温	配制DNase I 溶液・洗脱
Spin Column	50 支 x 1 袋	冷藏	上端组成：吸附柱 下端组成：收集管

 

 

运送方法

NIPPON GENE提供直送服务，将室温品和冷藏品的试剂盒、－20°C的产品、放入干冰的泡沫箱一同放入纸箱，在常温下进行运输。

 

 

◆使用实例

 

 

步骤

 

　　动物培养细胞：往动物细胞（不超过3 x 106 cells）里加入600 μl的C Extraction Buffer（细胞用），用移液器溶解细胞。

　　动物组织： 取新鲜动物组织（不超过10mg）或冷冻组织置于1.5 ml微量离心管，加入600 μlPT Extraction Buffer（组织用），直接用研磨杵捣碎。

　　涡旋30 秒以上。

 

　　▶　提取步骤如下：

 

　　　

 

 

Data 1　RNA的回收量标准和吸光谱

 

 

RNA的回收量标准

 

HeLa细胞	15 μg RNA/106cells
Jurkat细胞	10 μg RNA/106cells
Vero 细胞	15 μg RNA/106cells
小鼠脑	1.0 μg RNA/mg tissue
小鼠肝脏	3.5 μg RNA/mg tissue
小鼠肾脏	3.0 μg RNA/mg tissue
小鼠精巢	1.5 μg RNA/mg tissue

 

 

RNA的吸光度

 

 

 

 

Data 2　从培养细胞（HeLa）中提取RNA

 

 

　　　　

　　　　　1%凝胶琼脂糖 S

　　　　　右端: Marker 6

　　　　　泳道 1, 2, 3

　　　　　　             各0.5μg

 

　　从1 x 106 个HeLa细胞中提取出RNA后，进行吸光值测定和电泳（n = 3）。

 

260/280	260/230	µg/106 cells
2.035±0.019	2.254±0.028	19.30± 4.69