细菌基因组DNA快速提取试剂盒价格_品牌:泽叶生物-丁香通官网

库存：大量

英文名：细菌基因组DNA快速提取试剂盒

保质期：-20℃保存2年

供应商：上海泽叶生物科技有限公司

保存条件：-20℃

规格：盒

细菌基因组DNA快速提取试剂盒

● 裂解液MS中含变性剂，请不要直接接触皮肤。

● 漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释，即含75%乙醇。

产品说明

本产品用于细菌基因组DNA的小量提取。其纯化原理是利用细胞裂解液裂解细胞释放基因组DNA，由硅胶膜柱可逆吸附基因组DNA，经蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白质、脂质等杂质后，用纯化液洗脱获得基因组DNA。本产品可从0.5-2 ml对数生长期的菌液（不超过10⁶–10⁸ 个）中提取到3-20μg 超纯基因组DNA（OD_260/280= 1.7-1.9），此基因组DNA可直接用于酶切、PCR等后续实验。

质量控制

纯化的基因组DNA质量通过限制性酶切和单拷贝基因的PCR扩增鉴定。

保存条件

蛋白酶K室温运输，于-20℃保存，避免反复冻融。

其余试剂置于室温（15-25℃）干燥条件下保存1年。

如果消化缓冲液DS和MS中有沉淀，可在55℃加热溶解，待恢复室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA的纯化效率。

注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

● 漂洗液PE第一次使用前请按瓶上标签加入3倍体积的无水乙醇，即15 ml漂洗液PE加入45 ml无水乙醇，30 ml漂洗液PE加入90 ml无水乙醇，使用后立即盖紧盖子。

● 消化缓冲液DS和裂解液MS室温保存可能会有沉淀产生，在55℃加热溶解，待恢复至室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA纯化效率。

● 应尽量使用新鲜的菌体，确保提取的基因组DNA不被降解。

● 在操作步骤4中，菌体应充分悬浮，不要残留菌块，避免影响溶菌效果。

● 在操作步骤5中，加入无水乙醇后，可能会出现絮状沉淀，应将离心管内的溶液及絮状沉淀转移到纯化柱中，确保基因组DNA的得率。

● 基因组DNA需长期保存时，建议使用纯化液TE。用无菌的离心管分装后保存于-20℃或-80℃。

● 所有离心步骤均为室温下进行。

● 请严格按照操作步骤操作。

操作步骤--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

1 取0.5-2 ml处于对数生长期菌液，置于1.5 ml离心管中。12,000 rpm离心1min，弃上清。

2 向收集到的菌体沉淀中加入200 μl 缓冲液DS，用涡旋振荡器剧烈振荡直至菌体彻底悬浮。

● 对于较难破壁的革兰氏阳性菌，需加入溶菌酶消化细胞壁后，再进行基因组DNA的提取。具体方法为：向步骤1收集到的菌体中，加入108 μl消化缓冲液DS和72 μl的50 mg/ml的溶菌酶，振荡混匀。37℃处理30min以上。

● 如需要去除RNA，加完消化缓冲液DS或溶菌酶后，加入4 μl RNase A（100 mg/ml，N9042）溶液，振荡混匀，室温放置5min。

3 加入20 μl蛋白酶K溶液，55℃水浴或金属浴30min。

4 加入220 μl裂解液MS，涡旋振荡混匀，直至形成均一的悬浮液，65℃温浴10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠，室温放置5min使溶液冷却。

● 加入裂解液MS时可能会产生白色沉淀，一般65℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细菌细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA 不纯。

● 如菌体超过1.5 ml，可适当延长温浴时间。

5 加入220 μl无水乙醇，上下颠倒混匀，此时可能出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。将溶液及絮状沉淀转移到纯化柱中。12,000 rpm离心1min，弃滤液。

● 若溶液体积大于纯化柱容积（700 μl），可分两次离心。

● 此时基因组DNA被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。

● 如柱子堵塞表明菌体过量。若发生此情况，减少菌量，或适当延长离心时间，直至洗脱液顺利离心至离心管为止。