组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒价格_品牌:泽叶生物-丁香通官网

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英文名：组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒

保质期：-20℃保存2年

供应商：上海泽叶生物科技有限公司

保存条件：-20℃

规格：盒

组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒

● 裂解液MS中含变性剂，请不要直接接触皮肤。

● 漂洗液PE初次使用前用无水乙醇按1: 3稀释，即含75%乙醇。

产品说明

本产品用于多种动物组织（新鲜或冻存）与培养细胞等样本的基因组DNA的纯化。其纯化原理是利用细胞裂解液裂解细胞核释放基因组DNA，由硅胶膜柱可逆吸附基因组DNA，经蛋白酶消化、漂洗液清洗除去蛋白质、脂质以及多糖等杂质后，用纯化液洗脱获得基因组DNA。本产品可从不超过10 mg组织材料或不超过1×10⁶-10⁷培养细胞中提取到3-35 μg 超纯基因组DNA（OD₂₆₀/OD₂₈₀= 1.7-1.9），此基因组DNA可直接用于PCR、酶切、文库构建等后续实验。

质量控制

纯化的基因组DNA质量通过限制性酶切和单拷贝基因的PCR扩增鉴定。

保存条件

蛋白酶K室温运输，于-20℃保存，避免反复冻融。

其余试剂置于室温（15-25℃）干燥条件下保存1年。

如果消化缓冲液DS和MS中有沉淀，可在55℃加热溶解，待恢复室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA的纯化效率。

注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

● 漂洗液PE第一次使用前请按瓶上标签加入3倍体积的无水乙醇，即15 ml漂洗液PE加入45 ml无水乙醇，30 ml漂洗液PE加入90 ml无水乙醇，使用后立即盖紧盖子。

● 消化缓冲液DS和裂解液MS室温保存可能会有沉淀产生，在55℃加热溶解，待恢复至室温后混匀即可使用。不会影响基因组DNA纯化效率。

● 应尽量使用新鲜的实验材料，确保提取的基因组DNA不被降解。不能立刻提取基因组DNA 的实验材料应尽快置于液氮或-80℃冰箱中保存并避免反复冻融。

● 使用液氮研磨组织材料时，应随时加入液氮，确保提取的基因组DNA不被降解。

● 基因组DNA需长期保存时，建议使用纯化液TE。用无菌的离心管分装后保存于-20℃或-80℃。

● 所有离心步骤均为室温下进行。

● 请严格按照操作步骤操作。

操作步骤--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

[动物组织]

取少量样本材料，放入液氮预冷的研钵中，快速用力研磨的同时加入少量液氮，直至样本材料被研磨成粉末。将研磨好的样本转移至1.5 ml离心管中，每管组织材料含量应不超过10 mg。

● 某些匀浆困难，或在匀浆过程中DNA容易降解的特殊组织应加液氮研磨。如DNA酶含量丰富的组织：肝脏、脾脏、胰腺、胸腺、淋巴等；胶原蛋白含量丰富的组织：皮肤、肌腱等；角质蛋白含量丰富或坚硬的组织：骨骼等。

● 如没有液氮，可用剪刀剪成小块，放入研钵或匀浆器中，加入适量TE（pH 8.0），处理成细胞悬液。将不超过10 mg当量的细胞悬液转移至一个新的1.5 ml的离心管中，12000 rpm离心1min，弃上清，收集沉淀。

● 每支离心管中的样本当量不宜超过10 mg。每10 mg样本材料可获得10μg基因组DNA。样本量过大，将会影响细胞核裂解效率并可能堵塞纯化柱，进而降低基因组DNA的得率与纯度。

[细胞]

贴壁细胞：先用胰酶将贴壁细胞处理成细胞悬液，转移至1.5 ml离心管中，12,000 rpm离心1min，弃上清。

悬浮细胞：直接取适量转移至1.5 ml离心管中，12,000 rpm离心1min，弃上清。

● 每只离心管内的细胞量不应超过1×10⁶-10⁷。

2 加入200 μl消化缓冲液DS，漩涡振荡至形成完全均一的悬浮液。

● 如需去除RNA，可加入4 μl RNase A（100 mg/ml，N9042），振荡15秒，室温放置5min。

3 加入20 μl蛋白酶K，混匀，55℃水浴或金属浴，至组织完全溶解，通常需要1-3小时。对特别难溶解的组织如尾巴、昆虫可放置过夜。