产品详情
文献和实验
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库存 :大量
英文名 :PCR产物及DNA片段纯化试剂盒
保质期 :-20℃保存2年
供应商 :上海泽叶生物科技有限公司
保存条件 :-20℃
规格 :盒
PCR产物及DNA片段纯化试剂盒
产品组分
货号 |
ZY1091 (50次) |
ZY1092 (100次) |
ZY1093 (200次) |
溶液BD |
20 ml |
40 ml |
80 ml |
溶液PE |
15 ml |
15 ml×2 |
20 ml×3 |
溶液Eluent |
2.5 ml |
5 ml |
10 ml |
DNA纯化柱 |
50个 |
100个 |
200个 |
说明书 |
1份 |
1份 |
1份 |
● 溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
● 溶液BD中含有变性剂,请不要直接接触皮肤。
● 上述产品组分均可单独购买,详见产品索引。
产品说明
本产品采用传统的硅胶柱膜吸附技术,用于从PCR或其他各种酶促反应液中纯化DNA片段(50 bp-10 kb)。其纯化原理是硅胶膜柱高效可逆地吸附体系中的DNA片段(高盐、低pH值),同时去除酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他杂质,被吸附的DNA再在低盐、高pH值条件下被洗脱纯化。一次可回收30μg高纯度DNA片段,此DNA片段可直接用于各种酶促反应等。
质量控制
从PCR扩增产物中纯化50 bp和1,000 bp的DNA片段。
保存条件
室温保存2年。
注意事项--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
● 溶液PE第一次使用前请按瓶上标签加入4倍体积的无水乙醇,即15 ml溶液PE中加入60 ml无水乙醇,20 ml溶液PE中加入80 ml无水乙醇,使用后立即盖紧盖子。
● 本试剂盒适用于无选择性的回收体系中所有的DNA 片段。如需选择性回收特定片段,同时去除其他不同大小片段,建议选择凝胶回收试剂盒。
● 本试剂盒纯化柱的DNA吸附能力强。但如果DNA浓度小,或DNA初始量少,回收率将会偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA片段可直接用于各种酶促反应等,不会影响后续试验。
● 为了保证回收效率,请不要使用未调整pH值的超纯水洗脱目的片段。
● 请严格按照操作步骤操作。
操作步骤--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
1 确定PCR反应液或其他酶促反应液的体积。将PCR反应液或其他酶促反应液转移至一个新的1.5 ml离心管中,向其中加入等体积溶液BD,混合均匀。
2 将步骤1所获溶液置于DNA纯化柱中,静置2min。
● 若溶液体积大于纯化柱容积(700 μl),可分两次加入。
3 12,000 rpm离心1min,弃滤液。
● 此时DNA片段被吸附于DNA纯化柱中的硅胶膜上。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm, 离心1min,弃滤液。
● 溶液PE初次使用前用无水乙醇按1: 4稀释,即含80%乙醇。
● 此步骤的作用是将硅胶膜上吸附的蛋白、盐等杂质洗脱,以获得高质量DNA片段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm, 离心1min,弃滤液。
6 12,000 rpm离心3min,以彻底去除纯化柱中的液体。
● 此步骤的作用是去除残留乙醇,避免影响后续酶促反应。同时也利于DNA片段的充分溶解。
7 将离心柱置于新的1.5 ml离心管中。向纯化柱的中央处,悬空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃预热),静置2min。12,000 rpm离心1min,管底即为目的DNA片段。贮存于-20℃。
● 溶液Eluent可用无菌双蒸水代替,但其pH需为8.0-8.5,加入体积视DNA目的片段的多少、用户对目的片段浓度要求而定。
● 对溶液Eluent 65℃预热,会提高提取DNA目的片段的产量。
上海泽叶生物科技有限公司
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