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库存 :现货
英文名 :RNeasy Mini Kit (50)
保质期 :1年
供应商 :上海恒斐生物
规格 :50次
英文名称:RNeasy Mini Kit (50)中文名称:总RNA小提试剂盒 (50)
品 牌:Qiagen
货 号:74104
从细胞、组织或酵母中纯化至多100 μg的总RNA
- 数分钟内快速纯化得到高品质总RNA
- 即用型RNA在各种下游应用中表现良好
- 少量起始样本,RNA产量稳定
- 无需酚/ 氯仿抽提,无需氯化铯梯度离心,无氯化锂或者乙醇沉淀步骤
RNeasy Mini Kit可从细胞、组织或酵母中快速纯化高品质RNA,硅胶膜RNeasy离心柱的结合能力达100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的稳定组织样本,使用TissueRuptor或TissueLyser体系可有效的破碎组织。可在QIAcube全自动核酸纯化仪上应用RNeasy Mini Kit实现RNA纯化自动化。处理更小或更大的样本,可使用RNeasy Micro Kit(离心柱结合能力为45 µg RNA)、RNeasy Midi Kit(离心柱结合能力为1 mg RNA)和RNeasy Maxi Kit(离心柱结合能力为6 mg RNA)。
特点 | 参数 |
应用 | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
洗脱体积 | 30–100 µl |
规格 | Spin column |
主要样本类型 | Tissue, cells |
处理 | Manual (centrifugation) |
纯化总RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | Total RNA |
样本量 | 0.5–30 mg |
技术 | Silica technology |
每次运行或制备时间 | 20 minutes |
产量 | Varies |
性能
RNeasy Mini Kit可从至多30 mg动物或人类组织样本,或从100–1 x 107个动物或人类细胞样本或酵母中纯化总RNA(参见RT-PCR of RNA from as few as 100 cells和High-quality RNA from a variety of samples)。
样本来源 | 起始材料 | 平均产量(µg) |
---|---|---|
动物细胞 LMH HeLa COS-7 淋巴细胞(未受激) |
1 x 106 1 x 106 1 x 106 1 x 106 |
12 15 35 0.5 |
小鼠组织 肝 肺 脾 |
10 mg 10 mg 10 mg |
40 10 35 |
真菌细胞 S. cerevisiae |
1 x 107 |
25 |
原理
RNeasy Mini Kit可从少量的样本中高效纯化总RNA。RNeasy纯化技术整合了苯酚/异硫qing酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA纯化技术。纯化得到高品质的RNA,并且DNA残留水平达到最低。
操作流程
RNeasy Mini Kit可从10–1 x 107个动物或人类细胞中、0.5–30 mg动物或人类组织中或小于5 x 107个酵母细胞中方便的纯化总RNA。先对样本进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy硅胶膜(参见RNeasy Mini spin column)。RNA结合到膜上(最多可结合100 µg),污染物被高效洗去。对于某些对少量DNA十分敏感的RNA应用,可在RNeasy操作过程中进行柱上DNA酶处理,去除DNA残留。之后可在30–100 µl的纯水洗脱液中得到高浓度的纯化RNA(参见RNeasy Mini procedure)。还有各种特殊应用的实验方案可供选择。
应用
使用RNeasy技术纯化得到的RNA的A260/280比为1.9–2.1(10 mM Tris·Cl、pH 7.5的溶液中),适用于多种下游应用,包括:
- Northern印迹、点印迹和狭缝印迹
- 终点式RT-PCR
- 定量Real-Time RT-PCR
- 芯片分析
- Poly A+ RNA筛选
上海恒斐生物科技有限公司
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