冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒

冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒

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品牌:一研

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供应商 :上海一研

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规格 :200T

中文名称:冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒
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产品规格:200T
发货周期:1~3天
活性氧(Reactive oxygen species,ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(?OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子(?O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基(ROO? ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO? ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO-和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有“泄露”的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:“泄露”的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基(O2·-)。超氧阴离子遇水生成H2O2,同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的作用下生成,生成的过氧化氢在髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的催化下与Cl-反应可生成ClO-,在铁或铜离子的催化下发生Fenton反应生成OH·,超氧阴离子遇氮氧化物反应生成ONOO-。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
冰冻切片活性氧检测试剂盒是一种利用荧光探针DCFHDA进行活性氧检测的试剂盒。DCFHDA本身没有荧光,被活性氧特异性氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与活性氧水平成正比,检测绿色荧光就可以知道组织内活性氧的水平。
在激发波长500nm,发射波长525 nm附近,使用荧光显微镜/激光共聚焦检测绿色荧光,从而测定组织内活性氧水平。
储存条件:DCFHDA 探针-20℃避光保存;清洗液2-8℃保存。
有效期:一年。

冰冻切片活性氧(ROS)检测试剂盒 使用注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-EGFP,Propidium Iodide(PI)避光保存及使用。
3. Propidium Iodide (PI)有毒,操作时请戴手套。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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