鹅源性核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

鹅源性核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

价格: ¥1966

品牌:信裕生物

货号:XY-021062

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产品详情

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库存 :30

英文名 :鹅源性核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

保质期 :12个月

供应商 :上海信裕生物科技有限公司

保存条件 :请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月

规格 :48T

 鹅源性核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

鹅源性成分核酸检测试剂盒(一管式 PCR-荧光探针法)

◆ 产品说明

物种鉴定系列可针对食品、饲料等样品中动物源性成分的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩增曲线

判定结果。本产品用于鹅源性成分的检测,检出限为 0.1%。

◆ 产品组成(96 测试)

试剂 含量

A-鹅源-P 20μL × 8 管× 12 排

NG-P 100μL × 3 支

PG-鹅源-P 100μL × 2 支

◆ 适用仪器

ABI 7500、CFX 96、Mx 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。

◆ 自备耗材和仪器

①冰盒;②移液器(0.5-10μL,10-100μL,100-1000μL)及配套灭菌吸头;③离心机;④涡旋混匀器;⑤金属浴。

◆ 注意事项

1.本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。

1)第一区:样本制备区。

2)第二区:模板添加区。

3)第三区:扩增及产物分析区。

★ 分区之间最好进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。

2.实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。

3.严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。

4.反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心 30

秒,并按检测频次将反应液以适当体积分管保存。

5.反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。

6.不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。

◆样品处理

参照《SB/T 10923-2012 肉及肉制品中动物源性成分的测定 实时荧光 PCR 法》或其他标准处理样品,制备的

样本保存待用。

样品的采集和制备是动物源性鉴别的重要步骤,为防止交叉污染,应使用一次性消耗品,研钵应经 160℃干烤

2 h,其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用 1%次**钠溶液浸泡。

取样应尽量采取肌肉组织,对于同一批样品,应多点采集合并后,作为一份样品进行均质,提取 DNA。

采样过程应快速完成,将采取的样品迅速放入组织搅碎机中进行均质成糜状,充分混匀,取 0.1 g 充分混匀的

样品,采用液氮研磨或均质器均质。

详细步骤请按照标准操作或查阅食安通软件。

◆ 实验操作

请于-20℃条件下保存,有效期 12 个月

1.模板制备(样本制备区)

建议使用配套动物基因组 DNA 提取试剂盒,具体过程详见产品说明书。

2.添加模板(模板添加区,放置于冰盒上进行)

剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管,放置在室温待解冻后,离心 30 秒后揭开封口膜,向每管反应液

中分别加入 5μL 模板,顺序为 NG、待测样品模板、PG-鹅源-P。盖好配套的 PCR 管盖后,涡旋混匀 30s,离心 1min,

立即进行 PCR 扩增反应。

3.扩增反应(扩增及产物分析区)

使用荧光定量 PCR 仪,荧光基团选择 FAM,淬灭基团选择 TAMRA。

按下列条件设置扩增反应:

PCR 循环 荧光收集位点

95℃ 10 分钟 1 个循环 —

95℃ 15 秒

40 个循环

60℃ 1 分钟 ※

4.基线和阈值设定

基线调整取 3-15 个循环的荧光信号,阈值线应超过阴性对照扩增曲线的最高点

◆结果判定

检测样品无 Ct 值,曲线为直线或轻微斜线,无“S”型扩增曲线,可报告样品阴性,不含有鹅源性成分或含量低

于检出限;

检测样品 Ct≤30,曲线呈“S”型扩增曲线,可直接报告样品阳性,含有鹅源性成分;

检测样品 Ct>30,可直接报告样品阴性,不含有鹅源性成分或含量低于检测限。

★ NG 反应为平滑直线,PG 反应为“S”型扩增曲线,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果仍为无效,请与技术支持

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