EGE技术基因敲除/敲入鼠

提供商 ：百奥赛图

服务名称 ：基于CRISPR / EGE™的基因编辑技术

基于CRISPR / EGE™的基因编辑技术

 

CRISPR（clustered,regularly interspaced,short palindromic repeats）是一种细菌降解入侵病毒DNA和其他外源DNA的防御机制。来源于化脓链球菌的CRISPR / Cas9系统是目前最常用的一种。

Cas9蛋白首先与crRNA和tracrRNA结合形成复合物，然后结合靶序列形成RNA-DNA复合物，最终使DNA发生双链断裂。

crRNA识别靶DNA序列，tracrRNA是保持Cas9活性的必要组件。为了简化实验室中的基因编辑流程，将crRNA和tracrRNA融合在一起制备Single Guide RNAs（sgRNAs）。可以通过用同时表达sgRNA和Cas9蛋白的质粒转染细胞来编辑靶基因。 CRISPR / Cas9技术已成功用于细菌，酵母，植物，鱼类和哺乳动物，是最有效的基因编辑技术。

利用标准的CRISPR / Cas9技术，外源DNA与目标基因之间的同源重组（HR）效率比较低。百奥赛图自主开发了高效的基因编辑（Extreme Genome Editing，EGE™）系统，与标准CRISPR / Cas9技术相比，可将同源重组效率提高10-20倍。使用EGE™系统进行基因编辑更快，更便捷。 EGE™技术可以精确编辑几乎任何基因组位点的DNA序列，是制备多种基因编辑大小鼠模型的理想选择。
 

优势：

速度快	最快约2个月获得F0代阳性小鼠，5个月获得F1代小鼠
零风险	在强大的生产平台的支持下，如果项目失败，客户将获得全额退款
高效率	与标准CRISPR/Cas9技术相比，EGE™系统介导的同源重组效率提高了10-20倍
高质量	坚持Southern blot筛选，可较大程度减少随机插入引起的后续实验风险
多样化	大片段敲除，条件性敲除和基因敲入等
无物种限制	细胞系，小鼠，大鼠，猪，猴子和斑马鱼等

 

服务流程：
 

 

严格的质量控制：

Southern blot排除随机插入

对大量数据统计分析发现，基于CRISPR/Cas9技术的基因编辑课题中随机插入概率约为32%（来自打靶载体）。而在这32%中14%的随机插入无法依靠交配传代去除。排除随机插入的金标准是Southern blot检测。百奥赛图坚持进行Southern检测，以确保基因编辑获得的动物无随机插入。

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