NMY51 感受态细胞100ul*50

NMY51 感受态细胞100ul*50

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品牌:博湖

货号:BH-G2254

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库存 :39

英文名 :NMY51 感受态细胞

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ul*50

NMY51 感受态细胞100ul*50注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。 
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

产品描述:
产品名称 包装 分类
NMY51 感受态细胞100ul*50 100ul*50 酵母感受态细胞


NMY51 感受态细胞100ul*50操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。

同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B6酰基孟鲁司特-b-D-葡萄糖苷酸Montelukast acyl-b-D-glucuronide质量规格:美国进口

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四氢小檗碱(标准品)  Tetrahydroberberine,THB  质量规格:HPLC98%,标准品 小鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒 ,英文名: ACA-IgM ELISA Kit
通关藤苷I(标准品)  Tenacissoside I  质量规格:HPLC98%,标准品 小鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒 ,英文名: AMA ELISA Kit
通关藤苷G(标准品)  Tenacissoside G  质量规格:HPLC98%,标准品 小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA检测试剂盒MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 96T/48T
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小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(sNP/Sm)ELISA试剂盒 ,英文名: sNP/Sm ELISA Kit 通关藤苷H(标准品)  Tenacissoside H  质量规格:HPLC98%,标准品
小鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA检测试剂盒Mouseai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgA 96T/48T 葫芦素E(标准品)  Cucurbitacin E  质量规格:HPLC95%,标准品
小鼠抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒 ,英文名: ACA-IgA ELISA Kit 钩吻素子(标准品)  Koumine  质量规格:HPLC98%,标准品
小鼠抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA检测试剂盒Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgG 96T/48T 钩吻素甲(标准品)  Gelsemine  质量规格:HPLC98%,标准品
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小鼠抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒 ,英文名: ACA-IgM ELISA Kit 四氢小檗碱(标准品)  Tetrahydroberberine,THB  质量规格:HPLC98%,标准品
 

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