Ar 1193 感受态细胞100ul*10

Ar 1193 感受态细胞100ul*10

价格: 询价

品牌:博湖

货号:BH-G2230

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库存 :54

英文名 :Ar 1193 感受态细胞

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ul*10

Ar 1193 感受态细胞100ul*10培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
产品名称:Ar 1193 感受态细胞100ul*10
规格:100ul*10
分类:发根农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期):   -806个月)


Ar 1193 感受态细胞100ul*10注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
心脏微血管内皮细胞cDNAHCMEC cDNA溴化胆,从牛脂来(>98.0%(T))Cholesteryl Bromide from Beef Fat质量规格:>98.0%(T)

SLPI Others Human SLPI 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 胆壬酸酯(>89.0%(GC))Cholesterol Pelargonate质量规格:>89.0%(GC)
大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6胆壬基碳酸酯Cholesterol Nonyl Carbonate质量规格:
95-D细胞,高转移肺癌细胞 人喉癌细胞,M2e细胞 正常大鼠肾细胞;NRK胆庚基碳酸酯Cholesterol Heptyl Carbonate质量规格:
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2胆油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))Cholesterol Oleyl Carbonate质量规格:>70.0%(HPLC)
人导管瘤细胞;BT-4742,2'-二羟基偶氮苯(>98.0%(T))2,2'-Dihydroxyazobenzene质量规格:>98.0%(T)

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) S-乙酰半胱氨酸盐酸S-Acetamidomethyl-L-cysteine hydrochloride质量规格:>98%,BR
CM-R022大鼠甲状腺上皮细胞完全培养基100mLO-叔丁基-L-苏氨酸甲酯盐酸盐O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester hydrochloride质量规格:0.98
Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 牛肾细胞,MDBK细胞 Hs 578Bst(人成纤维细胞)L-丙氨酸异丙酯盐酸盐L-Alanine isopropyl ester hydrochloride质量规格:>98%
小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1L-天冬酰胺甲酯盐酸盐Methyl L-asparaginate monohydrochloride质量规格:0.98
脱氧熊果苷 HPLC98% 20mg HumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit 人着丝粒蛋白B(CENP-B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

脱氧野尻霉素 HPLC98% 5mg HumanCholicacidELISAKit 人胆酸(Cholicacid)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
脱乙酰灵芝酸F HPLC98% 5mg Humanchondroitinsulfate,CSELISAKit 人硫酸软骨素(CS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
拓扑替康 HPLC98% 20mg HumanChromogranin,CgAELISAKit 人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
王不留行环肽A HPLC98% 10mg Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
王不留行环肽B HPLC98% 5mg Humancoagulationfactor,FELISAKit 人凝血因子Ⅹ(F)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
王不留行黄酮苷 HPLC98% 20mg humancoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit 人促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
维生素A HPLC98% 20mg Humancomplemeconolprotein,CCPELISAKit 人补体调节蛋白(CCP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
维生素A醋酸酯 HPLC99% 20mg HumanComplemefragme4a,C4aELISAKit 人过敏毒素/补体片断4(C4a)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
维生素A HPLC99% 20mg HumanComplemefragme5a,C5aELISAKit 人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Ar 1193 感受态细胞100ul*10HumanCenomereProtein,CENP-B 人着丝粒蛋白B(CENP-B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 脱氧熊果苷 HPLC98% 20mg

HumanCholicacid 人胆酸(Cholicacid)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 脱氧野尻霉素 HPLC98% 5mg
Humanchondroitinsulfate,CS 人硫酸软骨素(CS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 脱乙酰灵芝酸F HPLC98% 5mg
HumanChromogranin,CgA 人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 拓扑替康 HPLC98% 20mg
Humancirculatingimmunecomplex,CIC 人循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 王不留行环肽A HPLC98% 10mg
Humancoagulationfactor,F 人凝血因子Ⅹ(F)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 王不留行环肽B HPLC98% 5mg
humancoicoopieleasinghormone,CRH 人促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 王不留行黄酮苷 HPLC98% 20mg
Humancomplemeconolprotein,CCP 人补体调节蛋白(CCP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 维生素A HPLC98% 20mg
HumanComplemefragme4a,C4a 人过敏毒素/补体片断4(C4a)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 维生素A醋酸酯 HPLC99% 20mg
HumanComplemefragme5a,C5a 人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 维生素A HPLC99% 20mg
Ar 1193 感受态细胞100ul*10操作说明:
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。

 

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