K599 感受态细胞100ul*50

K599 感受态细胞100ul*50

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品牌:博湖

货号:BH-G2226

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库存 :50

英文名 :K599 感受态细胞

CAS号 :详见说明书

保质期 :详见说明书

供应商 :上海博湖

保存条件 :低温冷藏

规格 :100ul*50

K599 感受态细胞100ul*50注意事项:
1. 加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10--
2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3.   DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。 
4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个 数量级。 --
6. 对于连接产物转化,转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物,保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时不可用孔径过小的枪头 (普通 200ul 枪头应剪去枪头尖 0.6cm)  避免用
力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞保存在-80以下,高于-80超期储存会导致转化效率会下降。
产品名称:K599 感受态细胞100ul*50
规格:100ul*50
分类:发根农杆菌感受态细胞
保存条件(保质期):   -806个月)


K599 感受态细胞100ul*50操作说明:
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟,待其沥干水分,正置 5 分钟,使乙醇充分挥发,
待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖,冰中静置 5 分钟充分降温。
2. -80保存的 XL1-Blue 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟,待其融化,加入目的 DNA (质粒或连接产物)并用手EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。 --
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19   --
B. 对于连接产物,请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 T 缓冲液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA 浓度 不超过 100ng/μl,体积不超过 5μl/50μl 感受态。--
3. 200 μl 枪头将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖--
4. 启动电转仪,设置参数:C=25 μFPC=200 ΩV=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推 荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。--
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入 700 μl 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基(室温),用 1ml 枪吹吸电击 杯底部数次混匀后,转移到 50ml 离心管(BD Falcon50ml 锥形离心管等),向离心管中补加 S.O.C. 培养基至 5ml 37225 rpm 复苏 60 分钟。--
6. 5000rpm 离心一分钟收菌,重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上(因菌量较大,若全部涂板 请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个)。将平板倒置放于 37培养箱过夜培养 13-17 小时。
MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞溴化乙锭(EB)Ethidium bromide(EB)质量规格:>95%

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0908 人破骨细胞完全培养基 100mL贝西沙星盐酸盐Besifloxacin HCl质量规格:>99%,BR
新生牛眼晶体上皮细胞;NBLE甜菜碱(标准品)Betaine质量规格:HPLC98%,标准品
FUCA1 Others Human FUCA1 人细胞裂解液 (阳性对照) 甜菜碱Betaine质量规格:>99%,无水高
肾上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)尿酸Uric acid质量规格:0.99
CCL22 Protein Human 重组人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 标签)灵芝酸I(标准品)Ganoderic acid I质量规格:HPLC98%,标准品

PA317(小鼠成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) TG100-115TG100-115质量规格:>98%,PI3Kγ/δ抑制剂
人低分化肺腺癌细胞;GLC-82 [GLC82]盐酸地芬尼多(标准品)Difenidol Hydrochloride质量规格:供含量测定用
人毛发基质细胞(HHZMC)( 5×105 )盐酸乌拉地尔Urapidil Hydrochloride质量规格:>99%,BR
CL-0463UM-UC-3(人膀胱移行细胞癌)5×106cells/瓶×2盐酸乌拉地尔(标准品)Urapidil Hydrochloride质量规格:含量测定
外消旋5-羟甲基去异丙基托特罗定-d6  rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6  质量规格:美国进口 载玻片细胞AIL蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20

外消旋去异丙基托特罗定  rac Didesisopropyl Tolterodine  质量规格:美国进口 载玻片细胞ANDROGEECEPTOR蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
外消旋5-羟甲基托特罗定  rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine  质量规格:美国进口 载玻片细胞APC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
外消旋5-羧基去异丙基托特罗定  rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine  质量规格:美国进口 载玻片细胞BAD蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
S-(-)-托特罗定  S-(-)-Tolterodine  质量规格:美国进口 载玻片细胞BCL2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
外消旋5-羧基托特罗定  rac 5-Carboxy Tolterodine  质量规格:美国进口 载玻片细胞CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
R-(+)-托特罗定  R-(+)-Tolterodine  质量规格:美国进口 载玻片细胞CASPASE-2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
(R)-5-羟甲基托特罗定  (R)-5-Hydroxymethyl Tolterodine  质量规格:美国进口 载玻片细胞CASPASE-3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
托吡酯-d12  Topiramate-d12  质量规格:美国进口 载玻片细胞CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
2,3-去亚异丙基托吡酯  2,3-Desisopropylidene Topiramate  质量规格:美国进口 载玻片细胞CASPASE-7蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
K599 感受态细胞100ul*50原生质酵母细胞转化试剂盒20 氨基他达那非  Amino Tadalafil  质量规格:美国进口

远西方杂交(FARWESTERNBLOT)印迹消除试剂盒20 盐酸特拉唑嗪  Terazosin hydrochloride  质量规格:美国进口
杂交清洗液500毫升 2-苄基咪唑啉  2-Benzylimidazoline  质量规格:美国进口
载玻片细胞AIL蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 外消旋5-羟甲基去异丙基托特罗定-d6  rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6  质量规格:美国进口
载玻片细胞ANDROGEECEPTOR蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 外消旋去异丙基托特罗定  rac Didesisopropyl Tolterodine  质量规格:美国进口
载玻片细胞APC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 外消旋5-羟甲基托特罗定  rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine  质量规格:美国进口
载玻片细胞BAD蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 外消旋5-羧基去异丙基托特罗定  rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine  质量规格:美国进口
载玻片细胞BCL2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 S-(-)-托特罗定  S-(-)-Tolterodine  质量规格:美国进口
载玻片细胞CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 外消旋5-羧基托特罗定  rac 5-Carboxy Tolterodine  质量规格:美国进口
载玻片细胞CASPASE-2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20 R-(+)-托特罗定  R-(+)-Tolterodine  质量规格:美国进口
K599 感受态细胞100ul*50培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。

 

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