Ar Qual 感受态细胞100ul*50

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英文名 ：Ar Qual 感受态细胞

CAS号 ：详见说明书

保质期 ：详见说明书

供应商 ：上海博湖

保存条件 ：低温冷藏

规格 ：100ul*50

同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
产品描述：

产品名称	包装	分类
Ar Qual 感受态细胞100ul*50	100ul*50	发根农杆菌感受态细胞

Ar Qual 感受态细胞100ul*50注意事项：
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。 
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。 
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
人淋巴成纤维细胞完全培养基 100mL烟酸乙酯(>98%,BR)Ethyl nicotinate质量规格：>98%,BR
HS-4细胞，人皮肤癌细胞系 鼠伤寒沙门氏菌Ta97 杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12二茂铁Ferrocene质量规格：>98%
XCL1 Protein Canine 重组狗 XCL1 蛋白 (His 标签)反苯环丙胺盐酸盐；单胺氧化酶(MAO)抑制剂Tranylcypromine (2-PCPA) HCl质量规格：>97%,单胺氧化酶(MAO)抑制剂
ME-180(人子宫颈表皮癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人细胞裂解液 (阳性对照) 黄胺酸(>96.5%，BS)Flavianic acid hydrate质量规格：>96.5%，BS
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21酸性品红钙(>60%，BS)Fuchsin acid calcium salt质量规格：>60%，BS
C57BL/6小鼠骨髓间质干细胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cellsAc-YVAD-肽核酸Ac-YVAD-pNA质量规格：>95%,BR
HME6细胞，人色素瘤细胞 动物双歧杆菌 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0919β-丙内酯(>95.0%(GC)(T))β-Propiolactone质量规格：>95.0%(GC)(T)
UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2DL-丙交酯(>98.0%(T))DL-Lactide质量规格：>98.0%(T)
Hut-102(人皮肤T淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022L-(-)-交酯(>98.0%(T))L-(-)-Lactide质量规格：>98.0%(T)
人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]δ-戊内酯(>98.0%(GC))δ-Valerolactone质量规格：>98.0%(GC)
无蛋白酶牛血清白蛋白  Albumin, from bovine Protease free  质量规格：>98%,分子生物学级 钙离子膜通道内质网肌醇1,4,5-三0酸受体(IP3R)功能荧光检测试剂盒20
硬脂酸铝  Aluminum stearate  质量规格：AR 钙离子膜通道内质网利罗丁受体(ryanodinereceptor;RyR)功能荧光检测试剂盒20
铋试剂III(>99%,BR)  Bismuth(III) nitrate pentahydrate  质量规格：>99%,BR 钙镁0酸平衡盐(PBS)缓冲溶液500毫升
氢钙二水(>98%,BR)  Calcium phosphate, dibasic, dihydrate  质量规格：>98%,BR 钙调蛋白结合检测试剂盒筛选5
碳酸铈  Cerium(III) carbonate, hydrate  质量规格：>99.9%,AR 钙转感受态细菌制备试剂盒1
胰凝乳蛋白酶原 A  Chymotrypsinogen A  质量规格：酶活：>1500 U/mg,BC 甘油(glycerol)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒20
汽巴蓝  Cibacron blue 3G-A  质量规格：ACS Grade 肝素(heperin)活性比色法定量检测试剂盒20
DEAE葡聚糖  DEAE Dextran  质量规格：BR 肝素(heperin)活性比色法定量检测试剂盒20
氟啶酮(>98%,植物激素级)  Fluridone  质量规格：>98%,植物激素级 肝素(heperin)纤维蛋白检测法(Fibrometer)分析试剂盒50
组胺(>98%,BC)  Histamine  质量规格：>98%,BC 肝素血液抗凝液100毫升
Ar Qual 感受态细胞100ul*50钙离子膜通道钙交换体(NCX/质膜)功能荧光检测试剂盒20 ADA缓冲液二钠盐(>99%,BR)  ADA buffer, disodium salt  质量规格：>99%,BR
钙离子膜通道内质网肌醇1,4,5-三0酸受体(IP3R)功能荧光检测试剂盒20 无蛋白酶牛血清白蛋白  Albumin, from bovine Protease free  质量规格：>98%,分子生物学级
钙离子膜通道内质网利罗丁受体(ryanodinereceptor;RyR)功能荧光检测试剂盒20 硬脂酸铝  Aluminum stearate  质量规格：AR
钙镁0酸平衡盐(PBS)缓冲溶液500毫升 铋试剂III(>99%,BR)  Bismuth(III) nitrate pentahydrate  质量规格：>99%,BR
钙调蛋白结合检测试剂盒筛选5 氢钙二水(>98%,BR)  Calcium phosphate, dibasic, dihydrate  质量规格：>98%,BR
钙转感受态细菌制备试剂盒1 碳酸铈  Cerium(III) carbonate, hydrate  质量规格：>99.9%,AR
甘油(glycerol)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒20 胰凝乳蛋白酶原 A  Chymotrypsinogen A  质量规格：酶活：>1500 U/mg,BC
肝素(heperin)活性比色法定量检测试剂盒20 汽巴蓝  Cibacron blue 3G-A  质量规格：ACS Grade
肝素(heperin)活性比色法定量检测试剂盒20 DEAE葡聚糖  DEAE Dextran  质量规格：BR
肝素(heperin)纤维蛋白检测法(Fibrometer)分析试剂盒50 氟啶酮(>98%,植物激素级)  Fluridone  质量规格：>98%,植物激素级
Ar Qual 感受态细胞100ul*50操作方法：
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。